等位酶技术在植物遗传多样性研究中的应用

第３ｌ卷第２期　农业科学研究　２Ｏ１Ｏ年６月　Ｖ０Ｉ．３１　Ｎｏ．２　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　Ｊｕｎ．２０１０　文章编号：１６７３－０７４７（２０１０）０２　００４８—０４　等位酶技术在植物遗传多样性研究中的应用　任晓月　，陈彦云　（１．宁夏大学西北退化生态系统恢复与重建教育部重点实验室，宁夏银川　７５００２１；　２．宁夏大学生命科学学院，宁夏银川　７５００２１）　摘要：概述等位酶的概念、等位酶分析的遗传学基础以及发展历史，简要介绍近年来等位酶技术在植物遗传多样　性研究中的应用进展．等位酶分析技术作为一种稳定的基因组标记，可以对种群的遗传学结构作出估计，测量种群　的遗传多样性以及各种群间的遗传距离，为植物遗传多样性及遗传育种等研究提供理论依据．因此，等位酶分析技　术是研究天然居群遗传结构及种质资源遗传多样性的重要手段．　关键词：等位酶；植物；遗传多样性；应用　中图分类号：Ｑ３４６　文献标志码：Ａ　生物多样性是现代生态学研究的核心问题和热　后者方便快捷，且可操作性强，已成为检测遗传多样　点之一，而遗传多样性是生物多样性研究的中心．遗　性最普遍的方法．等位酶分析技术是了解天然种群的　传多样性广义上是指地球上所有生物携带的遗传信　遗传结构、基因丰富程度以及栽培作物种质资源遗传　息的总和，而通常所说的遗传多样性是指种内不同　多样性的最重要手段，它作为稳定的遗传标志，对生物　种群间或一个种群内部不同个体的遗传变异１］］．对　种内和种问的遗传多样性、系统进化和亲缘关系等进　植物遗传多样性的研究一般是从形态学、细胞学、生　行研究，从分子水平方面揭示遗传变异和多样性的机　物化学和分子学这４个水平上进行研究的．从形态　理，为细胞学和形态学分类提供有说服力的证据　］．　学水平研究遗传多样性主要是研究遗传上较为稳定　的、不易受环境影响的性状，是通过有效的采样方　１等位酶分析技术　案，运用数学统计方法，对质量性状和数量性状进行　１．１　等位酶分析的遗传学基础　研究，揭示这些性状的遗传规律、变异大小以及种群　１９６９年，Ｐｒａｋａｓｈ等＿５　提出把同一基因位点的　的遗传结构　］．细胞遗传学主要研究染色体的变异，　不同等位基因所编码的一种酶的不同形式叫做等位　是生物多样性研究的重要方面．但是由于染色体是　酶（ａｌｌｏｚｙｍｅ）．根据构成酶的多肽上的基因位点的编　众多基因的“大包装”，其内部基因变化细节难以发　码不同，将同工酶遗传标记分为２种类型：同工酶与等　现，特别是对染色体数目一致和形态相似的种或种　位酶．构成酶的多肽是由２个以上基因位点所编码的　群的个体，单纯用形态学和细胞学手段研究遗传多　酶称同工酶；构成酶的多肽是由一个基因位点上不同　样性就会失去分辨力ｌ＿３］．而用生物化学和分子学手　的等位基因所编码的酶称等位酶．其实，等位酶是同工　段正好弥补了这一缺陷，使遗传多样性的研究深入　酶中的一种特殊形式．　到种群内个体间的分子水平上来．一般都是通过氨　等位酶分析的遗传学基础在于：根据中心法则，　基酸序列或同工酶或等位酶电泳的途径进行分析，　组成酶蛋白质多肽链的氨基酸种类和顺序是由　前者一般是一些分子标记技术，如ＲＦＬＰ（限制片断　ＤＮＡ核苷酸链的碱基编码所决定的．当ＤＮＡ链上　长度多态性），ＤＮＡ指纹（ＤＮＡ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ），　酶结构基因发生点突变时，一个或多个核苷酸发生　ＲＡＰＤ（随机扩增多态性ＤＮＡ），ＰＣＲ（聚合酶链式　了置换，就会导致由它编码的氨基酸的改变，从而可　反应）等，这些技术工作量大且耗时，可操作性差．而　以直接影响蛋白质的构型和静电荷的变化［４］．等位　收稿日期：２００９—１２—１３　基金项目：宁夏自然科学基金资助项目（ＮＺ０８０７）　作者简介：任晓月（１９８６一），女，宁夏中卫人，硕士研究生，主要从事植物生态学研究　通信作者：陈彦云，研究员，主要从事植物生态学研究，Ｅ—ｍａｉｌ：ｎｘｃｈｅｎｙｙ＠１６３．ｔｏｍ　第２期　任晓月等：等位酶技术在植物遗传多样性研究中的应用　４９　酶技术的基本原理就是根据电荷性质的差异，通过　蛋白质电泳或色谱技术和组织化学染色显示出等位　酶的不同形式，从而推断假定酶基因位点的所有等　位基因的存在　］．因为蛋白质是ＤＮＡ编码的产物，　所以使用等位酶技术的一个最基本的根据是，酶在　电场里移动性的改变反映了编码ＤＮＡ顺序上的改　变，因为酶谱类型是遗传的；第二个根据是，大多数　酶的不同形式都是等显性的，即１个基因位点上的　２个或多个等位基因都是能表达的，由它们所编码　的多肽链形成的酶蛋白质在凝胶上作为酶基因的表　现型都能显示出色带来，从而能被人们看见　Ｊ．　１．２等位酶分析技术的发展　１９５９年，Ｍａｒｋｅｔ等首次提出同工酶的概念．　１９６６年，Ｈｕｂｂｙ等将同工酶电泳分析首次用于估计　人类的遗传变异和果蝇天然居群的遗传变异群＿８］，　之后同工酶电泳分析在动物研究中被广泛使用．随　着资料的积累和方法上的需要，Ｒｉｏｈａｒｄｓｏｎ等　］出　版了《等位酶电泳一动物系统学和居群研究手册》．　在植物研究中利用同工酶技术则起步稍晚一　点．Ｇｏｔｔｉｌｅｂ【　ｕ首次用于种子植物，Ｓｏｌｔｉｓ等口２Ｊ开　始用于蕨类植物，Ｃｕｍｍｉｎｓ等　副在苔鲜植物的遗传　多样性、系统学和进化研究中也开始使用同工酶资　料．自此以后，同工酶的资料开始被广泛地应用于植　物的遗传多样性、系统学和进化研究中．１９６９年，等　位酶概念从广义的同工酶概念中分离出来，使等位　酶分析技术成为一种更为有效的遗传多样性检测技　术．目前，此技术已得到广泛应用，国际上已有了一　套非常成熟的电泳、染色、遗传分析和数据处理的方　法［１　，并能对大批基因位点进行定量研究　．然　而，等位酶分析技术仍存在一些弱点，比如实验结果　随植物不同发育时期、器官及环境而变化；可利用的　遗传位点数量比较少，常规电泳方法只能检测出　ＤＮＡ序列中１／４左右的碱基替换；对电泳分析的样　品要求较高　．　２　等位酶分析技术在植物遗传多样性　中的应用　等位酶分析技术具有较宽的应用范围，对研究　种以下类群的居群遗传学结构、遗传多样性、繁育系　统、探查无性系、地理变异、种间界线、近期系统发育　重建、标本鉴定、推断杂种或多倍体的亲本、类群间　的亲缘性等都有巨大的潜力［　］．Ｗｏｌｆｆ＿２ｏ］以车前属　的Ｐ．ｍａｊＯｒ＂，Ｐ．ＣＯＦＯｎＯｐｕｓ，Ｐ．１ａｎｃｅｏｌａｔａ为材料，利　用等位酶淀粉凝胶电泳技术，分析比较３个种的繁　殖系统及形态变异能力，结果表明：Ｐ．ＣＯＴＯ￣２ＯｐＬｔＳ和　Ｐ．１ａｎｃｅｏｌａｔａ为自交繁育系统，具有相似的形态变　异但变异较低，而Ｐ．ｍａｊｏｒ则有较高的形态变异．　崔继哲等　】］应用等位酶分析方法，测定了松嫩平原　南部微生境下羊草灰绿色和黄绿色２种生态型９个　种群的遗传多样性及遗传分化程度，表明羊草种、种　群和生态型水平都维持较高的遗传多样性，２种生　态型之间有明显的遗传多样性差异及遗传分化．Ｌｉ　等【＿２　利用等位酶技术、ＲＡＰＤ和ＳＳＲ（微卫星　ＤＮＡ）分子标记法对以色列Ａｍｒａｉａｄ区的野生二粒　小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ｄｉｃｏｃｃｏｉｄｅｓ）进行遗传多样性分析，　结果表明：ＲＡＰＤ和ＳＳＲ区的野生二粒小麦的亚种　群内部遗传多样性高于等位酶区；而等位酶区亚种　群问的遗传变异大于ＲＡＰＤ和ＳＳＲ区，可能是由　于干旱气候选择的结果．张颖娟等　应用等位酶分　析方法对鄂尔多斯特有种四合木种群进行研究，发　现四合木在种群水平上维持较高的遗传多样性，大　部分遗传多样性存在于种群内，而种群间遗传分化　很低．李洪梅等　采用等位酶分析法对中国沙棘与　俄罗斯沙棘的８个品系的遗传多样性进行分析，结　果表明：沙棘具有丰富的遗传多样性．Ｇｒｕｂｂｓ等＿２　采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对美国北部人参３２　个天然居群和１２个栽培品种的遗传多样性和居群　结构进行检测，结果发现：天然居群内遗传多样性较　低，但居群问具有较高水平的遗传变异．杨敏生　等ｌ２阳从欧洲中部及美国收集了１８个刺槐种源种　子，以２年生苗木为材料，采用水平切片淀粉凝胶电　泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳对１１个酶系统进行检测，　共发现２０个酶位点，其中１４个为多态位点，多态位　点百分数为７Ｏ　．Ｐｅｒｓｓｏｎ等Ｌ２　采用等位酶分析技　术对欧洲榛（Ｃｏｒｙｌｕｓ　ａｖｅｌｌａｎａ　Ｌ．）的４Ｏ个天然群　体进行遗传多样性分析，结果表明：欧洲榛种群间分　化显著，边缘种群内部遗传多样性低于中心区，其遗　传多样性指标基因分化系数（Ｇｓｔ）为ｌ９．７　，丰富　度为２４　，原因可能为冰河期过后物种大暴发形成　的瓶颈效应所致．Ｃｈａｎｇ等口　采用聚丙烯酰胺凝胶　电泳技术对韩国濒危植物Ｍｅｇａｌｅｒａｎｔｈｉｓ　ｓａｎｉｃｕｌｉ～　ｆｏｌｉａ的２７个酶位点进行检测，发现Ｍ．ｓａｎｉｃｕｌｉｆｏ—　ｌｉａ具有较高的遗传多样性和一定程度的遗传分化，　每个位点平均等位基因数为１．４７，多态位点百分率　为４ｏ　，平均预期杂合度为０．０８８，居群间存在２７．　１　的遗传变异．袁庆华等Ｌ２　利用等位酶分析技术　将采自北京及其周边地区的１４个野生胡枝子属植　物进行了遗传分析，发现胡枝子属植物各居群间存　在较高的遗传分化程度．罗建勋等¨３。。也应用等位酶　分析法对中国西部亚高山特有树种云杉（Ｐｉｃｅａ　ａｓ—　ｐｅｒａｔａ）１０个天然群体的３００个个体的遗传多样性　和遗传分化进行研究，结果表明：云杉群体间等位基　因的频率分化显著，其他云杉属树种基因的渐渗、群　体微生境差异和不同强度的选择压力可能是造成群　５０　农业科学研究　第３１卷　体间分化显著的主要原因．Ｓｅｇａｒｒａ—Ｍｏｒａｇｕｅｓ等　利用水平淀粉凝胶电泳技术对车前草科柳穿鱼属的　蛋黄草（Ｔｏａｄｆｌａｘｅｓ（Ｌｉｎａｒｉａ　Ｍｉｌｌｅｒ））进行遗传多　反映现存物种的相对遗传关系，而且可以解释物种形　成与灭绝的机制，有利于揭示保持生态系统功能稳定　性和弹性的规律，确保制定各种政策和对策的科学性，　使经济、社会同自然资源、生态系统协调发展，对最终　实现可持续发展的战略目标具有重大意义．　样性分析，结果发现：蛋黄草遗传多样性很高，平均　等位基因有效数目（Ａｅ）为２．２８，总的遗传多样性　（ＨＴ）为０．２４，种群内多样性（ＨＳ）为９３．９９　．杨艳　等［３　采用不连续系统的聚丙烯酰胺垂直板凝胶电　泳对新疆新麦草的５个天然居群和１个栽培种遗传　多样性和居群结构进行等位酶分析，结果表明：新麦　参考文献：　［１１　马克平．试论生物多样性的概念［Ｊ］．生物多样性，　１９９３，１（１）：２０—２２．　草具有丰富的遗传多样性，其多样性可能与生境、人　工驯化、风媒异交等因素有关．Ｐｏｔｅｎｋｏ［３。　对俄罗斯　远东地区的１２个冷杉种群的２Ｏ个酶位点进行水平　淀粉凝胶电泳分析，分析表明：冷杉遗传多样性水平　较高，平均每个位点等位基因数为２．６３，多态位点百　分数为８８．１　，实际杂合度为０．１８１，期望杂合度为　０．１８９．Ｃｈｕｎｇ等口　采用水平淀粉凝胶电泳技术对　韩国南部濒危物种圆叶石豆兰和槐叶萍进行等位酶　变异分析，结果发现：种群内部遗传多样性极低，圆　叶石豆兰的平均期望杂合度（Ｈｅ）为０．Ｏ１１，槐叶萍　的Ｈｅ为０．００２；而居群间遗传分化水平较高，圆叶　石豆兰居群间遗传分化系数（Ｆｓｔ）为０．２５３，槐叶萍　的Ｆｓｔ为０．８９９，表明外源基因的流入对韩国南部石　生和附生植物种群基因的形成具有重要作用．胡红菊　等＿３朝利用超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳　技术，对２８６份梨材料进行等位酶遗传变异分析，发现　梨属植物具有丰富的遗传多样性，可用等位酶基因型　指纹区分与鉴定梨品种．曹酷等　利用等位酶分析技　术对２４份扁蓿豆种质材料进行分析，发现扁蓿豆具有　较高的遗传多样性．廖卉荣等［３　对紫丁香的４个天然群　体进行等位酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，从２８个酶系统　中筛选出６个具有多态性的酶系统，标记了８个多态性　基因位点、２２个等位基因，发现多个等位基因位点与群　体环境因子之间存在显著相关，表明这些多态性酶位点　具有明显的生态适应性．总之，就目前来看，等位酶分析　技术仍然是了解天然居群遗传结构、基因丰富度以及栽　培作物种质资源遗传多样性最重要的手段．　３　结语　等位酶分析技术在植物遗传多样性研究中的应　用已积累了丰富的资料，在采样原则、实验方法、数　据处理和结果分析方面形成了一套统一的标准，并　建立起检测种群遗传分化、遗传多样性和基因流水　平上的定量指标，使不同物种的研究结果可以在共　同的基础上进行比较＿３　．等位酶分析技术的应用扩　大了人们对生物遗传变异和进化的认识，使人们对　自然界物种的遗传结构有更进一步的了解．　对植物遗传多样性的进一步深入研究，不仅可以　［２］毕玉芬，卢欣石．植物遗传多样性及种群生态学研究进　展［Ｊ］．甘肃农业大学学报，１９９９，３４（１）：１－５．　［３］　王中仁．植物遗传多样性和系统学研究中的等位酶分　析［Ｊ］．应用生态学报，１９９４，２（２）：３８—４３．　［４］　王中仁．植物等位酶分析［Ｍ］．北京：科学出版社，１９９６．　［５］ＰＲＡＫＡＳＨ　Ｓ，ＬＥＷＯＮＴＩＮ　Ｒ　Ｃ，ＨＵＢＢＹ　Ｊ　Ｌ．Ａ　ｍｏ－　ｌｅｃｕｌａｒ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ　ｉｎ　ｎａｔｕｒａｌ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ，ｌＶ，ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃｅｔｒｏｌ，ｍａｒｇｉｎａｌ　ａｎｄ　Ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｄｒｏ—　ｓｏｐｈｉｌａ　ｐｓｅｕｄ００ｂｓｃｕｒａ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９６９，６１：８４１—８５８．　［６１　李运贤，李玉荚，邢倩，等．植物多样性的分子生物学研　究方法［Ｊ］．南阳师范学院学报，２００５，４（９）：５３—５６．　［７］　王中仁．等位酶分析的遗传学基础［Ｊ］．生物多样性，　１９９４，２（３）：１４９—１５６．　Ｉ－８］　葛颂．遗传多样性及其检查方法［Ｇ１∥钱迎倩，马克　平．生物多样性研究原理与方法．北京：中国科技出版　社，１９９４：１２３—１４０．　［９］　ＲＩＥＨＡＲＤＳＯＮ　Ｂ　Ｊ，ＢＡＶＥＲＳＴＯＣＫ　Ｐ　Ｒ，ＡＤＡＭＳ　Ｍ．Ａｌｌｏｚｙｍｅ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ—Ａ　ｈａｎｄ　ｂｏｏｋ　ｆｏｒ　ａｎｉｍａｌ　ｓｙｓｔｅｍａｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｓｔｕｄｉｅｓ［ｇ，１．Ｏｒｌａｎｄｏ：Ａｅ—　ａｄｅｍｉｅ　Ｐｒｅｓｓ，１　９８６．　Ｅ　１　０，１　ＧＯＴＴＩＬＥＢ　Ｌ　ｎ　Ｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ：ｎｅｗ　ａｐｐｒｏａｃｈｔｏ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ［Ｊ，１．Ｂｉｏ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７１，２１：９３９－９４４．　［１１］ＧＯＴＴＩＬＥＢ　Ｌ．Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｐｌａｎｔ　ｐｏｐ￣ａ—　ｔｉｏｎｓ［Ｊ１．Ｐｒｏｇ　Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍ，１９８１，７：１—４６．　［１２１　ＳＯＬＴＩＳ　Ｄ　Ｅ。ＨＡＵＦＩ　ＥＲＥ　Ｈ，ＧＡ　ＮＹ　Ｇ　Ｊ．Ｄｅｔｅｅｔｉｎ４ｇ　ｅｎｚｙｍｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｆｅｒｎ　ｇｅｎｕｓ　Ｂｏｍｍｅｒ：ａｎａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ＿Ｊ］．Ｓｙｓｔ　Ｂｏｔ，１９８０，５：３０－－３８．　ｒ　１　３，１　ＣＵＭＭＩＮＳ　Ｈ，ｗＹＡＴＴ　Ｒ．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ　ｉｎ　ｎａｔ—　ｕｒａｌ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍＯＳＳ　Ａｔｒｉｃｈｕｍ　ａｎｇｕｓｔａｔｕｍ　［Ｊ］．Ｂｒｙｏｌｏｇｉｓｔ，１９８１，８４：３０—３８．　［１４］方德秋，张文方，肖顺元．应用同工酶进行柑橘分类和　进化研究［Ｊ］．植物分类学报，１９９３，３１（４）：３２９—３５２．　［１５］　江洪，王琳．柏林属植物过氧化物酶同工酶的研究　Ｉ－Ｊ］．植物分类学报，１９８６，２４（４）：２５３—２５９．　［１６］　熊全沫．同工酶电泳数据的分析及其在种群上的应用　［Ｊ］．遗传，１９８６，８（１）：１－５．　［１７］　高明君，　秀玲，何孟元，等．ＴＡＩ系列Ⅱ中的冰草染　色体与小麦部分同源关系的生化证据［Ｊ］．植物学报，　１９９４，３６（增刊）：７９—８５．　［１８１　沈浩，刘登义．遗传多样性概述［Ｊ１．生物学杂志，　２００１，１８（３）：５—７．　第２期　任晓月等：等位酶技术在植物遗传多样性研究中的应用　５１　［１９］　王中仁．植物遗传多样性和系统学研究中的等位酶分　析［Ｊ］．生物多样性，１９９４，２（１）：３８—４３．　［２Ｏ］　ＷＯＬＦＦ　Ｋ．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ａｌｌｏｚｙｍｅ　ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ　ｉｎ　ｔｈｒｅｅ　ｐｌａｎｔａｇｏ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ａ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｔｏ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｌａｔｉｏｎ　ｓｉｚｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅａｔｅｎｅｄ　ｐｌａｎｔ　Ｍｅｇａｌｅｒａｎｔｈｉｓ　ｓａｎ～　ｉｃｕｌｉｆｏｌｉａ（Ｒａｎｕｎｃｕｌａｃｅａｅ）ｉｎ　Ｋｏｒｅａ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００５，４８（４）：３３９—３５０．　张吉宇，张文淑．胡枝子属野生居群遗传多样性　［２９］　袁庆华，的等位酶分析口］．草业学报，２００６，１５（５）：１０９—１１４．　顾万春，陈少瑜．云杉天然群体遗传多样性的等　［３Ｏ］　罗建勋，位酶变异【＿Ｊ］．植物生态学报，２００６，３０（１）：１６５—１７３．　Ａ～～　０ＲＡＧＵＥＳ　Ｊ　Ｇ，Ⅳ【ＡＴＥＵ—ＡＮＤＲＥＳ　Ｉ．Ｌｅｖｅｌｓ　［３１］　ＳＥＧＡＲＲ　ｏｆ　ａｌｌｏｚｙｍｅ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ｃｌｏｓｅｌｙ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏａｄｆｌａｘｅｓ（Ｌｉｎａｒｉａ，　Ｐｌａｎｔａｇｉｎａｃｅａｅ）ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ￣］］．Ｔｈｅｏｒ　Ａｐｐｌ　Ｇｅｎｅｔ，１９９１，８１：１１９—１２６．　［２１］　崔继哲，曲来叶，祖元刚．微生境下羊草两种生态型种　群遗传多样性及遗传分化一等位酶分析［Ｊ］．生态学　报，２０００，２Ｏ（３）：４３４—４３９．　［２２］　Ｕ　Ｙ（）Ｕ　ＣＨＵＮ，ＴｚＩ（）Ｎ　ＦＡＨＩＭＡＩ　，ＴＡＭＡＲ　ＫＲＵＧ—　ＭＡＮＬ，ｅｔ　ａ１．Ｐａｒａｌｌｅｌ　ｍｉｃｒｏｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ　ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｂｙ　ａｌｌｏｚｙｍｅ，ＲＡＰＤ，ａｎｄ　ｓｙｓｔｅｍｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｃｏｎｓｅｒｖ　ｅｎｅｔ，Ｇ２００７，８：３７３—３８３．　［３２］　杨艳，韩建国，孙彦，等．新麦草遗传多样性等位酶分　析ＬＪ］．草业科学，２００７，２４（８）：５９—６３．　ａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔ～　［３３］　Ｐ０ＴＥＮＫ０　Ｖ　Ｖ．Ａｌｌｏｚｙｍｅ　ｖａｒｉｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅｓ　ｉｎ　ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ｄｉｃｏｃｃｏｉｄｅｓ　ａｔ　ａｍｍｉａｄ，Ｉｓｒａｅｌ＿Ｊ］．　Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２０００，ｌ：ｌ９１－２０７．　［２３］　张颖娟，杨持．鄂尔多斯特有种四合木种群遗传多样　性的等位酶和ＲＡＰＤ比较研究［Ｊ］．内蒙古大学学报：　自然科学版，２００３，３４（２）：１６１　１６５．　ｉｃ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓｉｎ　Ｐｉｃｅａ　ｊｅｚｏｅｎｓｉｓ（Ｐｉｎａｃｅａｅ）Ｐｏｐｕｌａ～　ｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｕｓｓｉａｎ　ｆａｒ　ｅａｓｔＥＪ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，　２００７，４５：２９１—３０４．　［２４］　李洪梅，蓝登明，何文兴．８个沙棘品系间等位酶水平　遗传多样性研究ＥＪ］．沙棘，２００３，１６（４）：１２—１５．　ｌｏｚｙｍｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ａ—　［２５］　ＧＲＵＢＢＳ　Ｈ　Ｊ，ＣＡＳＥ　Ｍ　Ａ．Ａｌ［３４］　ＣＨＵＮＧ　Ｍ　Ｙ，ＰＡＲＫ　Ｃ　Ｗ，ＣＨＵＮＧ　Ｍ　Ｇ．Ｅｘｔｒｅｍｅ－　ｌｙ　ｌｏｗ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ａｌｌｏｚｙｍｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｋｏｒｅａｎ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｒａｒｅ　ａｎｄ　ｅｎｄａｎｇｅｒｅｄ　ｌｉｔｈｏｐｈｙｔ～　ｉｃ　ｏｒ　ｅｐｉｐｈｙｔｉｃ　Ｂｕｌｂｏｐｈｙｌｌｕｍ　ｄｒｙｍｏｇｌｏｓｓｕｍ　ａｎｄ　Ｓａｒ—　ｃａｎｔｈｕｓ　ｓｃｏｌｏｐｅｎｄ　ｏｌｉｕｓ（Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ）：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｍｅｒｉｃａｎ　ｇｉｎｓｅｎｇ（Ｐａｎａｘ　ｑｕｉｎｑｕｅＪｂｌｉｕｓ　Ｉ　．）：Ｖａｒｉａ—　ｔｉｏｎ，ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｓｙｓｔｅｍ，ａｎｄ　ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｃｕｒｒｅｎｔ　ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｐｒａｃｔｉｃｅ［Ｊ］．Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，　２００４，５：１３－２３．　ｆｏｒ　ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ　Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ，　２００７，１６：７７５—７８６．　［２６］　杨敏生，ＨＥＲＴＥＬ　Ｈ，ＳＣＨＮＥＣＫ　Ｖ．欧洲中部刺槐　种源群体等位酶变异研究［Ｊ］．遗传学报，２００４，３ｌ　（１２）：ｌ３９—１４７．　　ａ１．Ａ１一　［２７］　ＰＥＲＳＳ０Ｎ　Ｈ，ＷＩＤＥＮ　Ｂ，ＡＮＤＥＲＳＳ（）Ｎ　Ｓ，ｅｔｌｏｚｙｍｅ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｍａｒｇｉｎａｌ　ａｎｄ　［３５］　胡红菊，王友平，张靖国，等．梨属植物等位酶遗传多　样性研究［Ｊ］．中国农学通报，２００８，２４（１１）：３１９—３２２．　［３６］　曹结，谷安琳，赵来喜，等．扁蓿豆遗传多样性的等位　酶研究［Ｊ］．西北植物学报，２００８，２８（１０）：２　００５—２　０１０．　顾万春，明军．紫丁香天然群体的等位酶遗传多　［３７］　廖卉荣，样性分析［Ｊ］．北京林业大学学报，２００９，３１（５）：８５—８９．　　［３８］　华丽，潘伯荣．遗传多样性透视［Ｊ］．干旱区研究，２００３，２０（１）：２８—３１．　ｃｅｎｔｒａｌ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｃｏｒｙｌｕｓ　ａｖｅｌｌａｎａ　Ｌ．（Ｂｅｔｕｌａｃｅ—　ａｅ）ｉｎ　Ｅｕｒｏｐｅ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｓｙｓｔ　Ｅｖｏｌ，２００４，２４４：１５７—１７９．　［２８］　ＣＨＡＮＧ　ＣＨＩＮ　ＳＵＮＧ，ＣＨＯｌ　Ｄ　Ｙ，ＫＩＭ　Ｈ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｏｆ　ａｌｌｏｚｙｍｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｐｏｐｕ一　Ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｌｌｏｚｙｍｅ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｂｏｔａｎｉｃａｌ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｒｅｎ　Ｘｉａｏｙｕｅ　，Ｃｈｅｎ　Ｙａｎｙｕｎ　’。　（１．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｄｅｇｒａｄｅｄ　Ｅｃｏｓｙｓｔｅｍ　ｉｎ　Ｎｏｒｔｈ—ｗｅｓｔｅｒｎ　Ｃｈｉｎａ，　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ　７５００２１，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｉｎｇｘｉａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ　７５００２１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｐｔ　ｏｆ　ａｌｌｏｚｙｍｅ，ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ　ｏｆ　ａｌｌｏｚｙｍｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ（ＡＡ）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｈｉｓｔｏｒｙ　ｏｆ　ＡＡ　ｗａｓ　ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｗｅ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ　ｔｈｅ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏ｛　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＡＡ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂｏｔａｎｉｃａｌ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｓｏ　ｗｅ　ｔｈｉｎｋ，ａｓ　ａ　ｓｔａｂｌｅ　ｇｅｎｏｍｅ　ｍａｒｋ，　ＡＡ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｔｏ　ｍｅａｓｕｒｅ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｓｔａｎｃｅ　ａｍｏｎｇ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ，ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｔｈｅ　ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ．Ｉｎ　ａ　ｗｏｒｄ，ｔｈｅ　ＡＡ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｉｓ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｔｏ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｇｅｎｅｕｃ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ａ　ｎａｔｕｒａｌ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ａｌｌｏｚｙｍｅ；ｐｌａｎｔｓ；ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　（责任编辑、校对魏乐）