急性胆道感染诱发肝细胞凋亡的实验研究

Ｊ　１　１　Ｊ，ｂ　、＾　临床肝胆病杂志第３Ｏ卷第１１期２０１４年１１月Ｊ　Ｃｌｉｎ　ＨｅｐａｔｏｌＶｏ１．３０　Ｎｏ．１１，Ｎｏｖ．２０１４　，急性胆道感染诱发肝细胞凋亡的实验研究　王熙勋　，姜立新　，王景麟　，　梁静　，翟慧渊　，夏先明　四川省泸州医学院，四川泸州６４６０００）　（１烟台毓璜顶医院，山东烟台２６４０００；２　摘要：目的研究急性胆道感染过程中是否存在肝细胞凋亡，并探讨肝细胞凋亡的可能机制。方法３０只实验大鼠适应喂养　７　ｄ后随机分为５组，每组６只，其中１组为对照组，余下４组为实验组。实验组通过胆总管注入大肠埃希菌，建立急性胆道感染模　型，并于注入大肠埃希茵６、１２、２４及４８　ｈ后处死。对照组动物胆总管内注入１　ｍｌ生理盐水，６　ｈ后处死。取各组肝组织，制作切　片。ＨＥ染色，光镜下观察；Ｔｕｎｎｅｌ染色，计数调亡肝细胞，免疫组织化学试验检测ｂｃｌ一２及Ｂａｘ的表达，各组数据组问比较采用方　差分析，进一步两两比较采用ＬＳＤ—ｔ检验以及Ｄｕｎｎｅｔｔ　ｓ　Ｔ３法。结果对照组肝组织无明显病理变化，而实验组各组可见肝细胞　凋亡改变。各实验组与对照组相比，Ｔｕｎｎｅｌ染色阳性表达差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５），２４及４８　ｈ组Ｔｕｎｎｅｌ染色阳性表达较１２　ｈ组明显增加，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。对照组与实验组间Ｂａｘ表达差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），在实验组间随着时间延　长表现出增多的趋势，但差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。而Ｂｃｌ一２在对照组和６及１２　ｈ实验组问差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），　但随着时间的延长，２４及４８　ｈ组与１２　ｈ组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论急性胆道感染后肝细胞在短时间内即会出　现细胞凋亡，并且贯穿于急性胆道感染始终，基因层面表现为Ｂａｘ表达增强，Ｂｃｌ一２表达减弱。Ｂａｘ与Ｂｃｌ一２等凋亡相关基因表　达的改变与肝细胞凋亡存在时间上的一致性，表明肝细胞凋亡可能与Ｂａｘ与Ｂｅｌ一２等基因有关。　关键词：胆道疾病；细胞凋亡；肝细胞；疾病模型，动物　中图分类号：Ｒ５７５．６　文献标志码：Ａ　文章编号：１００１—５２５６（２０１４）１１—１１６４—０５　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ａｃｕｔｅ　ｂｉｌｉａｒｙ　ｔｒａｃｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ＷＡＮＧ　Ｘｉｘｕｎ，ＪＩＡＮＧ　Ｌｉｘｉｎ，ＷＡＮＧ　Ｊｉｎｇｌｉｎ，ｅｔ　ａ１．（Ｙｕｈｕａｎｇｄｉｎｇ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｙａｎｔａｉ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ　２６４０００，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｘａｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ａｃｕｔｅ　ｂｉｌｉａｒｙ　ｔｒａｃｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａｆｔｅｒ　ａｄａｐｔｉｖｅ　ｆｅｅｄｉｎｇ　ｆｏｒ　ｓｅｖｅｎ　ｄａｙｓ，３０　ｍａｌｅ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｉｖｅ　ｇｒｏｕｐｓ（ｎ＝６　ｅａｃｈ），ｉ．ｅ．，ｏｎｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｉｎｊｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　０．２　ｍｌ　ｏｆ　ｓａｌｉｎｅ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｃｏｍｍｏｎ　ｂｉｌｅ　ｄｕｃｔ　ａｎｄ　ｆｏｕｒ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎｊｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｎ　ｅｑｕａｌ　ｖｏｌｕｍｅ　ｏｆ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ｃｅｌｌ　ＳＵＳ—　ｐｅｎｓｉｏｎ　ｔｏ　ｂｕｉｌｄ　ａｎ　ａｃｕｔｅ　ｂｉｌｉａｒｙ　ｔｒａｃｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｍｏｄｅ１．Ａｎｉｍａｌｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｋｉｌｌｅｄ　６　ｈ　ａｆｔｅｒ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓａｌｉｎｅ．ａｎｄ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｏｕｒ　ｅｘｐｅｉｒｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｋｉｌｌｅｄ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　ａｔ　ｔｈｅ　ｔｉｍｅ　ｐｏｉｎｔｓ　ｏｆ　６，１２，２４，ａｎｄ　４８　ｈ　ａｆｔｅｒ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｅ．ｃｏｌｉ．Ｌｉｖｅｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｗｅｒｅ　ｔａｋｅｎ　ｆｒｏｍ　ａｌｌ　ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｔｏ　ｐｒｅｐａｒｅ　ｔｉｓｓｕｅ　ｓｅｃｔｉｏｎｓ．Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｆｅａｔｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ——ｅｏｓｉｎ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｌｉｇｈｔ　ｍｉｃｒｏｓ—　ｃｏｐｙ．Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｗａｓ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｃｅｌｌ　ｃｏｕｎｔｉｎｇ　ａｆｔｅｒ　ＴＵＮＥＬ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｉｎｄｅｘ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ａｐ—　ｏｐｔｏｓｉｓ—ｒｅｌａｔｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ（Ｂｃｌ一２　ａｎｄ　Ｂａｘ）ｗａｓ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｄａｔａ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ　ａ—　ｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖａｒｉａｎｃｅ．ａｎｄ　ｐａｉｒｗｉｓｅ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ＬＳＤ—ｔ　ｔｅｓｔ　ａｎｄ　Ｄｕｎｎｅｔｔ　ｓ　Ｔ３　ｔｅｓｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｉｓｓｕｅ　ｓｐｅｃｉ—　ｍｅｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ　ｈａｄ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ，ｗｈｉｌｅ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．　Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｆｏｕｒ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐｓ　ｈａｄ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｇｒｅａｔｅｒ　ｖａｌｕｅｓ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｔｉｅ　ｉｎｄｅｘ（Ｐ＜０．０５）．Ａｄｄｉｔｉｏｎａｌｌｙ，　ｔｈｅ　ｖａｌｕｅｓ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｉｎｄｅｘ　ｉｎ　ｔｈｅ　２４　ａｎｄ　４８　ｈ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｏｖｅｒ　ｔｉｍｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　１２　ｈ　ｅｘｐｅｒｉ—　ｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｂａｘ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜　０．０５），ｓｈｏｗｉｎｇ　ａ　ｓｌｉｇｈｔ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｔｒｅｎｄ　ｏｖｅｒ　ｔｉｍｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌａｔｔｅｒ　ｆｏｕｒ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．Ｂｃｌ一２　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｈａｄ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　６　ｏｒ　１２　ｈ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．Ｏｖｅｒ　ｔｉｍｅ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｉｎ　Ｂｃｌ一２　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　１　２　ｈ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　２４　ｏｒ　４８　ｈ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｈｅｐａｔｏｅｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｃｃｕｒｓ　ｗｉｔｈｉｎ　ａ　ｓｈｏｒｔ　ｔｉｍｅ　ａｆｔｅｒ　ａｃｕｔｅ　ｂｉｌｉａｒｙ　ｔｒａｃｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｉｔ　ｐｅｒｓｉｓｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｗｈｏｌｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．ｗｉｔｈ　ｉｎ—　ｃｒｅａｓｅｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂａｘ（ｉｎｄｕｃｅｒ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）ａｎｄ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ一２（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）．Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ—ｒｅｌａｔｅｄ　ｇｅｎｅｓ　ｃｏｉｎｃｉｄｅ　ｗｉｔｈ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇ　ｔｈａｔ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｍａｙ　ｂｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｂｏｘ　ａｎｄ　Ｂｃｌ一２　ｇｅｎｅｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｂｉｌｉａｒｙ　ｔｒａｃｔ　ｄｉｓｅａｓｅｓ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ；ｄｉｓｅａｓｅ　ｍｏｄｅｌｓ，ａｎｉｍａｌ　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１—５２５６．２０１４．１１．０１８　收稿日期：２０１４—０５—２１；修回日期：２０１４—０７—３１。　作者简介：王熙勋（１９７０一），男，副主任医师，主要从事消化系统相关疾病研究。　通信作者：王景麟，电子邮箱：ｚｓａｎｔｇ＠１６３．ｃｏｎ。　王熙勋，等．急性胆道感染诱发肝细胞凋亡的实验研究　１　１　６５　急性胆道感染是一种常见的胆道疾病，包括急性　胆囊炎和胆管炎，全球每年发病率在１％～３％，它往　往伴发于胆道结石、胆道肿瘤及其他胆道疾病。急性　胆道感染发生后，细菌及内毒素造成胆管黏膜充血等　变化，严重者可出现肝功能异常甚至肝衰竭。造成肝　Ｔｕｎｎｅｌ染色标本根据阳性细胞分布情况，选择２个阳　性视野，计数２００个细胞中阳性细胞数作为凋亡指数　（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｅｘ，ＡＩ）并进行统计。所有切片上加中　性树胶封片，加盖玻片，光学显微镜下拍照。选取Ｂｃｌ　一２及Ｂａｘ基因作为细胞凋亡的标志基因，通过免疫　脏受损的细胞机制，尤其是否存在肝细胞凋亡，目前　组化检测Ｂｃｌ一２及Ｂａｘ在不同组别大鼠肝细胞中的　尚没有权威研究。以往部分研究所使用的胆道感染　表达。使用相关试剂对不同组大鼠的肝组织进行免　动物模型，存在一定缺陷，需要进一步完善。本实验　旨在通过建立改进的大鼠急性胆道感染模型，探讨急　性胆道感染过程中是否存在肝细胞凋亡，并对相关凋　亡基因的表达加以研究。　１材料和方法　１．１　材料清洁雄性ＳＤ大鼠３０只，体质量（３５０±　２０）ｇ，购自上海斯莱克实验动物有限公司；胆道感染　致病菌选用大肠埃希氏菌，由中国生物制品鉴定中心　提供，菌号：４４６６４，菌液浓度为５×１０　／ｍｌ；台式高速　冷冻离心机（ｅｐｐｅｎｄｏｆｆ）；ｒａｂｂｉｔ　ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ　ｔｏ　ｂｃｌ一２　（Ｂｉｏｗｏｒｌｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．），工作浓度：１：１００；ｒａｂｂｉｔ　ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ　ｔｏ　ｂａｘ（Ｂｉｏｗｏｒｌｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．），工作浓　度：１：２００；ＳＰ免疫组化染色试剂盒（福州迈新生物技　术开发有限公司）等。　１．２方法及观察指标大鼠常规适应性饲养７　ｄ后，　在保证存活及体质量无明显差异情况下，随机分为５　组，每组６只，其中１组作为对照组，余下４组作为实　验组，接受手术操作后分别在６、１２、２４和４８　ｈ接受处　理或检测。以３％的戊巴比妥（３０　ｍｇ／ｋｇ）腹腔内注射　麻醉大鼠，从上腹正中切口，进入腹腔。实验组大鼠　在胆总管十二指肠上方１　ｃｍ处向近端注入０．２　ｍｌ浓　度为５×１０　／ｍｌ的大肠埃希氏菌，制成急性胆道感染　动物模型。对照组大鼠在胆总管内注入０．２　ｍｌ生理　盐水，其他操作同前。所有大鼠记录胆道注入相应试　剂的时间，术后均单笼饲养，做好标记，禁食固体食　物，仅喂食无菌糖盐水。实验组４组大鼠按照分组计　划，分别于胆道手术后６、１２、２４及４８　ｈ时将所有大　鼠处死，取其肝组织置于１０％甲醛液固定６—１２　ｈ，取　出用石蜡包埋，制成蜡块备用。将包埋了大鼠肝组织　的蜡块进行修块、脱水、包埋、切片（每例肝组织切片　份数保证后续实验使用）等处理后，分别进行ＨＥ染　色和Ｔｕｎｎｅｌ染色。ＨＥ染色切片在光学显微镜下进行　病理形态学观察，包括肝组织结构是否正常，细胞是　否完整以及肝细胞脂肪变性、坏死、充血、出血情况。　疫组化，染色后封片照相，观察Ｂｃｌ一２及Ｂａｘ在肝组　织中的表达。染色结果采用半定量分析方法：评分以　染色强度结合阳性细胞数百分比进行乘积。染色强　度以多数细胞呈现的染色强度并减去背景着色计分：　无明显着色为０分；淡黄色或轻微黄色为１分；深黄　或棕黄色为２分；棕褐色或黑褐色为３分。每个视野计　数１００个细胞中阳性细胞数，计算阳性细胞平均数：０～　５％评为０分；６％～２５％评１分；２６％～５０％评２分；　５１％一７５％评３分；＞７５％均评为４分。对每个视野均　进行染色强度计分与阳性细胞百分比乘积评分。　１．３　统计学方法应用ＳＰＳＳ１７．０统计软件对数据进　行分析。各组数值以均数±标准差（　±ｓ）表示，组间比　较采用方差分析，两两比较解采用ＬＳＤ—ｔ检验和Ｄｕｎ－　ｎｅｔｔ　Ｓ　Ｔ３法。以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　２　结果　２．１　实验动物情况对照组及实验组大鼠取标本前　均存活。　２．２病理观察通过对小鼠肝组织切片的观察，对照　组胞浆红染、胞核蓝染、肝细胞排列规整，未见明显病理　变化，而实验组各组肝组织均见变性、坏死，坏死灶随时　间的推移有增多、面积增大的趋势。感染６　ｈ后处死实　验组可见肝细胞小灶性变性、坏死，炎细胞浸润，坏死灶　内伴大量红细胞，散在肝细胞嗜酸性变性；感染１２　ｈ后　处死实验组大鼠可见肝细胞存在嗜酸性变性，表现为胞　浆深红染，胞核固缩。坏死灶内偶见细菌；２４　ｈ后出现　肝细胞灶性变性坏死，炎细胞浸润；４８　ｈ出现肝细胞脂　肪变性，胞浆内脂滴沉积（图１）。　２．３　Ｔｕｎｅｌ实验检测结果Ｔｕｎｎｅｌ染色阳性表达在各　组间差异有统计学意义（Ｆ＝２４．１３，Ｐ＜０．０５），对照组　可见少量凋亡肝细胞，对照组分别与实验组相比，其　Ｔｕｎｎｅｌ染色阳性表达差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；　ＡＩ在实验组问随时间延长有所增加，其中２４和４８　ｈ　组Ｔｕｎｎｅｌ染色阳性表达较６与１２　ｈ组明显增加（Ｐ＜　０．０５）（表１）。　王熙勋，等．急性胆道感染诱发肝细胞凋亡的实验研究　１　１　６７　凋亡贯穿于急性胆道感染始终，这与病理切片观察结　果相一致。有学者认为：作为“程序性细胞死亡”，凋亡　清除受损肝细胞，可以减少炎症反应和细胞成分泄漏　到细胞外空间，从而延缓细胞坏死的发展　Ｊ。实验中　随着造模时间的延长，肝细胞凋亡及坏死均加重，笔者　认为可能是凋亡不足以完全清除受损肝细胞，越来越　多的受损肝细胞在外部炎症刺激及内环境改变影响下　出现坏死，从而导致大片坏死灶的出现。　早在１９８８年，Ｌａｓｔｅｒ等　就认为肿瘤坏死因子　（ＴＮＦ）　在不同细胞中、不同量情况下，可诱发细胞坏　死或凋亡。王俊学等　则证实肝细胞凋亡过程中有　ＴＮＦｏｔ的参与。ＴＮＦｏｔ在核内、核外均可诱导肝细胞凋　亡，且调亡程度与ＴＮＦｏｔ剂量呈正相关　Ｊ。而姚燕珍　等ｌｌ　曾通过实验证实胆道感染时ＴＮＦａ明显增高。　ＴＮＦｏｔ在胆道感染时出现明显增高，究其原因，可能与　胆道感染时体内产生大量的内毒素，从而刺激机体产　生了包括ＴＮＦｃ￣在内的大量细胞因子和趋化因子有　关＿】卜　。此外，研究发现，大鼠胆道感染后存在诱导型　一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的持续高表达　，而ｉＮＯＳ被认　为可诱导产生过高浓度的ＮＯ，产生细胞毒作用。赵昱　等¨　发现ｉＮＯＳ来源的ＮＯ可促进神经细胞凋亡的发　生。而有研究证实ＮＯ在肝功能受损过程中起到了一　定的作用¨引，在肝细胞中其是否能如神经细胞及卵泡　细胞中一样诱发肝细胞凋亡有待于进一步研究。　目前针对细胞凋亡相关基因的研究多与Ｂｃｌ一２　家族有关，Ｂｃｌ一２家族蛋白包括Ｂｃｌ一２、Ｂｃｌ—ＸＬ、　Ｍｃｌｌ、Ｂａｘ、Ｂａｋ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄ等，分为促凋亡基因及抑制凋　亡基因两大类　。Ｂａｘ、Ｂｃｌ一２分别作为促凋亡基因　和抑制凋亡基因的代表被广泛研究　卜埔　，作为同源　蛋白，两者各自本身可形成同源二聚体或二者结合成　异源二聚体，其结合形式取决于二者的比例。除异源　二聚体较稳定，无诱导或拮抗凋亡作用外，当Ｂａｘ自　身形成二聚体时，促凋亡效果更为明显，而当Ｂｃｌ一２　自身形成二聚体时，抑制凋亡作用更大。当组织中一　种基因表达超出正常比例时，稳定的异源二聚体将分　解，多表达出的相应蛋白形成自身二聚体的数量增　加，从而表现出相应的凋亡调控功能　。本实验选　取Ｂａｘ及Ｂｃｌ一２作为检测基因，结果显示：与对照组　相比，Ｂｃｌ一２在实验６、１２　ｈ组中表达减少，但差异无　统计学意义（Ｐ＞０．０５），在２４及４８　ｈ组表达明显减　少（Ｐ＜０．０５）；与１２　ｈ组相比，２４及４８　ｈ组表达明显　减少（Ｐ＜０．０５）。Ｂａｘ在所有实验组中表达较对照组　明显增加，其差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；但各实　验组间比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。从以上结　果可以看出，Ｂａｘ的变化更多体现在实验结束后较短　时问之内（＜６　ｈ），而Ｂｃｌ一２的变化则在２４～４８　ｈ问　更明显。而这种变化与Ｔｕｎｎｅｌ结果中出现６—１２　ｈ　及２４～４８　ｈ两阶段凋亡指数的明显变化一致。笔者　推断，结合Ｂａｘ与Ｂｃｌ一２的生物特性，较早阶段的凋　亡出现与早期Ｂａｘ蛋白表达的明显增多有关，而持续　一段时间之后出现的明显凋亡则可能和Ｂｃｌ一２的减　少有一定关系。　由此可见，急性胆道感染后肝细胞在短时间内即　会出现细胞凋亡，并且贯穿于急性胆道感染始终，而　其发生可能与多种机制相关，进一步研究其可能的发　生机制，从而干预胆道感染时肝细胞凋亡这一过程，　可能会对胆道感染的治疗提供更为有效的支持。　参考文献：　［１］　ＫＥＲＲ　ＪＦＲ，ＷＹＬ　ＬｌＥ　ＡＨ，ＣＵＲＲＩＥ　ＡＲ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：ａ　ｂａｓｉｃ　ｂｉ—　ｏｌｏｇｉｃａｌ　ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ　ｗｉｔｈ　ｗｉｄｅ　ｒａｎｇｉｎｇ　ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｉｓｓｕｅ　ｋｉｎｅｔｉｃｓ［Ｊ］．Ｂｒ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，１９７２，２６（４）：２３９—２５７．　［２］ＬＡＨＯＲＴＥ　ＣＭ，ＶＡＮＤＥＲＨＥＹＤＥＮ　ＪＬ，ＳＴＥＩＮＭＥ］￣Ｎ，ｅｔ　ａ１．　Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ—ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｒａｄｉｏｌｉｇａｎｄｓ：ｃｕｒｒｅｎｔ　ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｒｔ　ａｎｄ　ｆｕｔｕｒｅ　ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ［Ｊ］．Ｅｕｒ　Ｊ　Ｎｕｃｌ　Ｍｅｄ　Ｍｏｌ　Ｉｍａｇｉｎｇ，　２００４，３１（６）：８８７—９１９．　［３］ＸＩＡ　ＸＭ，ＨＥ　Ｋ，ＦＥＮＧ　ＣＨ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈｏｌａｎｇｉｔｉｓ　ａｎｄ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｇｅｎｅ［Ｊ】．Ｃｈｉｎａ　Ｊ　Ｍｏｄｅｒｎ　Ｍｅｄ，２００６，１６（２）：２３３－２３６，２４０（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　夏先明，贺凯，冯春红，等．胆道感染与肝细胞凋亡及凋亡相　关基因的表达［Ｊ］．中国现代医学杂志，２００６，１６（２）：２３３—　２３６，２４０．　［４１　ＬＡＬｌＳＡＮＧ　ＴＪ。ＳＪＡＭＳＵＨｌＤＡＪＡＴ　Ｒ，ＳｌＲＥＧＡＲ　ＮＣ。ｅｔ　ａ１．　Ｐｒｏｆｉｌｅ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｂｉｌｅ　ｌａｋｅｓ　ｂｅｆｏｒｅ　ａｎｄ　ａｆ－　ｔｅｒ　ｂｉｌｅ　ｄｕｃｔ　ｄｅｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｓｅｖｅｒｅ　ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ　ｊａｕｎｄｉｃｅ　ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］Ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ　Ｐａｎｃｒｅａｔ　Ｄｉｓ　Ｉｎｔ，２０１０，９（５）：　５２０—．５２３．　ｆ５１　ＦＩＣＫＥＲＴ　Ｐ．ＴＲＡＵＮＥＲ　Ｍ．ＦＵＣＨＳＢＩＣＨＬＥＲ　Ａ。ｅｔ　ａ１．Ｏｎｃｏ－　ｓｉｓ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ　ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｔｙｐｅ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　ｉｎ　ｍｏｕｓｅ　ｍｏｄｅｌｓ　ｏｆ　ｃｈｏｌｅｓｔａｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２００５，４２（３）：３７８－３８５．　［６］ＭＡＬＨＩ　Ｈ，ＧＯＲＥＳ　Ｇ　Ｊ。ＬＥＭＡＳＴＥＲＳ　ＪＪ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｎｅｃ—　ｒｏｓｉｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｉｖｅｒ：Ａ　ｔａｌｅ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｄｅａｔｈｓ［Ｊ］．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，　２００６，４３（２　Ｓｕｐｐｌ　１）：ｓ３１一ｓ４４．　『７１　ＬＡＳＴＥＲ　ＳＭ．ＧＯＯＤ　ＪＧ．ＧＯＯＤＩＮＧ　ＬＲ。ｅｔ　ａ１．Ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃ—　ｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｃａｎ　ｉｎｄｕｃｅ　ｂｏｔｈ　ａｐｏｐｔｉｃ　ａｎｄ　ｎｅｃｒｏｔｉｃ　ｆｏｒｍｓ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　ｌｙｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ　ＪｍｍｕｎｏＩ，１９８８，１４１（８　Ｊ：２６２９－２６３４．　［８］ＷＡＮＧ　ＪＸ，ＷＡＮＧ　ＧＪ，ＣＡＩ　Ｘ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｏｘｙｍａｔｒｉｎｅ　ｏｎ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＴＮＦ—　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｌｉｖｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　Ｌ０２　［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２０１１，１７（４）：２１０－２２１．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　王俊学，王国俊，蔡雄．氧化苦参碱对肿瘤坏死因子诱导的人　Ｌ０２肝细胞凋亡的影响［Ｊ］．临床肝胆病杂志，２０１１，１７（４）：　２１Ｏ一２２１．　Ｊ　Ｊ，、ｎ　１　１　ｂ石　临床肝胆病杂志第３０卷第１１期２０１４年１１月Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｈｅｐａｔｏｌ，Ｖｏ１．３０　Ｎｏ．１１。Ｎｏｖ．２０１４　［９］ＬＥＩＳＴ　Ｍ．ＧＡＮＴＥＲ　Ｆ，ＢＯＨＬＩＮＧＥＲ　Ｉ，ｅｔ　ａ１．Ｍｕｒｉｎｅ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　赵昱，李莉，尹青．大鼠局灶性脑缺血再灌注中ｉＮＯＳ源性ＮＯ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｂｙ　ＴＮＦ—ａｌｐｈａ　ｒｅｑｕｉｒｅｓ　对Ｂｃｌ一２．Ｂａｘ表达的影响［Ｊ］．神经解剖学杂志，２００５，２１　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ａｒｒｅｓｔ［Ｊ］．Ｊ　ＩｍｍｕｎｏＩ，１９９４，１５３（４）：１７７８—７８８　（５）：５３９—５４２．　『１０］　ＹＡＯ　ＹＺ．ＢＡＯ　ＺＪ．Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ＩＬ一６，ＩＬ一８　『１５］　ＭＡＴＳＵＤＡＴ。ＳＡｌＴＯ　Ｈ。ＦＵＫＡＴＳＵ　Ｋ。ｅｔ　ａ１．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ—ｍｏｄ－　ａｎｄ　ＴＮＦ—ｏ／．ｉｎ　ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉＯｎ　ａｆｔｅｒ　ｏｐｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｉｌｌ－　ｕｌａｔｅｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｔ　ｌｏｃａｌ　ｓｉｔｅ　ａｕｇｍｅｎｔｓ　ａｒｙ　ｔｒａｃｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］Ｊ　Ｍｅｄ　Ｒｅｓ，２０１２，４１（４）：１Ｏ４—１０６．　ｅｘｕｄａｔｉｖｅ　ｎｅｕｔｒｏｐｈｉ　ｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｒｅｆｌｅｃｔｓ　ｉｎｆＩａｍｍａｔ０ｒｖ　ｒｅ－　（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　ｓｐｏｎｓｅ　ａｆｔｅｒ　ｓｕｒｇｅｒｙ［Ｊ］．Ｓｕｒｇｅｒｙ，２００１，１２９（１）：７６－８５　姚燕珍，鲍舟君血清ＩＬ一６、ＩＬ一８和ＴＮＦ—ｄ在胆道术后感染监　［１　６］　ＹＯＵＬＥ　ＲＪ，ＳＴＲＡＳＳＥＲ　Ａ　Ｔｈｅ　Ｂｃｌ－２　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｆａｍｉＩｙ：ｏｐｐｏ—　测中的价值［Ｊ］．医学研究杂志，２０１２，４１（４）：１０４—１０６　ｓｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｔｈａｔ　ｍｅｄｉａｔｅ　ｃｅｌ　ｌｄｅａｔｈ『Ｊ］．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｍｏｌ　Ｃｅｌ　ｌ［１１］　ＬＥ０Ｎ　ＣＧ。ＴＯＲＹ　Ｒ。ＪＩＡ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ　ＤｉｓｃｏｖｅＨ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐ—　Ｂｉｏｌ。２００８，９ｆ１）：４７—５９．　ｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｌｌｌｉｋｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　４（ＴＬＲ４）ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：ａ　ｎｅｗ　ｐａｒａ—　『１　７］＼＾ｆＡＮＧ　ＪＴ。ＧＯＮＧ　ＳＳ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓｉＲＮＡ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐｒｏ—　ｄｉｇｍ　ｆｏｒ　ｔｒｅａｔｉｎｇ　ｓｅｐｓｉｓ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｄｉｓｅａｓｅｓ［Ｊ］　Ｐｈａｒｍ　Ｒｅｓ，　ｔｅｉｎ　ｋｉｎａｓｅ　ＣＫ２ｏＬ　ｏｎ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｌａｒｙｎｇｅａｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ　２００８。２５（８）：１７５１—１７６１．　［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｍｅｄ　Ｊ（Ｅｎｇ１），２０１２，１２５（９）：１５８１—１５８５．　『１　２］　ＹＩ　Ｊ　Ｍ．ＧＵＡＮ　ＹＳ　Ｐｒｏｃｅｓｓ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｉｎｆｌａｍｍａｔ０ｒｙ　『１８］　ＫＯＢＡＹＡＳＨ１　Ｔ．ＳＡＷＡ　Ｈ。ＭＯＲｌＫＡＷＡ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｂａｘ　ｉｎｄｕｃ—　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｂｉｌｉａｒｙ　ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｇｅｎ　Ｓｕ　ｒｇ，　ｔｉｏｎ　ａｃｔｉｖａｔｅｓ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｃａｓｃａｄｅ　ｖｉａ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ　２０１２，２１（５）：６０７—６１０（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　Ｃ　ｒｅｌｅａｓｅ　ａｎｄ　ｂａｘ　ＯｖｅｒｅｘＯｒｅｓｓｉ０ｎ　ｅｎｈａｎｃｅｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ—　易杰明，关养时胆道梗阻后炎症反应发生的过程及机制［Ｊ］　ｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ａｇｅｎｔｓ　ｉｎ　ｄｉｄ一１　ｃｏｌｏｎ　ｃａｎｃｅｒ　中国普通外科杂志，２０１２，２１（５）：６０７－６１０　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｊｐｎ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２０００，９１（１２）：１２６４—１２６８　ｆ　１３］　ＣＨＥＮ　Ｇ．ＺＨＯＵ　ＳＱ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｉＮＯＳ　ｉｎ　『１９］　ＳＰＲＩＣＫ　ＭＲ．ＷＡＬＣＺＡＫ　Ｈ．Ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒｐｌａｙ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　Ｂｃｌ一　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ　ｏｆ　ｒａｔ　ｗｉｔｈ　ｂｉｌｉａｒｙ　ｔｒａｃｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｗｉｔｈ　ａｂｄｏｍ—　２　ｆａｍｉｌｖ　ａｎｄ　ｄｅａｔｈ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ—ｍｅｄｉａｔｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｂｉｏ—　ｉｎａｌ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｅｘｐ　Ｓｕｒｇ，２００３，２０（１２）：１０８３—　ｃｈｉｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ａｃｔａ，２００４，１６４４（２—３）：１２５—１３２　１０８４．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　陈刚，邹声泉．胆道感染与腹腔感染大鼠肝细胞诱生型～氧化　引证本文：ｗＡＮＧ　ＸＸ，ＪＩＡＮＧ　ＬＸ，ＷＡＮＧ　ＪＬ，ｅｔ　ａｌ　Ｅｘｐｅｒｉ－　氮合酶表达差异的实验研究［Ｊ］中华实验外科杂志，２００３，　ｍｅｎｔａｌ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ａｃｕｔｅ　ｂｉｌｉａｒｙ　２０（１２）：１０８３—１０８４．　ｔｒａｃｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２０１４，３０（１１）：１１６４—　［１４］　ＺＨＡＯ　Ｙ。ＬＩ　Ｌ。ＹＩＮ　Ｑ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｉＮＯＳ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ＮＯ　ｏｎ　Ｂｃｌ　１１６８．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　—．２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｆｏｃａｌ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅ－－　王熙勋。姜立新，王景麟，等急性胆道感染诱发肝细胞凋亡　ｍｉａ　ａｎｄ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔｓ『Ｊ　１　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｎｅｕ　ｒｏａｎａｔｏｍｙ。　的实验研究［Ｊ］临床肝胆病杂志，２０１４，３０（１１）：１１６４—　２００５，２１（５）：５３９—５４２．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　１１６８　（本文编辑：刘晓红）　・国外研究进展介绍・　在等待肝移植的患者中，应用非选择性１３受体阻滞剂与　提高腹水患者生存率相关　【据《Ｇｕｔ｝２０１４年１０月报道】题：在等待肝移植的患者中，应用非选择性１３受体阻滞剂与提高腹水患者生存　率相关（作者Ｌｅｉｔｈｅａｄ　ＪＡ等）　最近有数据表明，在等待肝移植患者中，应用非选择性Ｂ受体阻滞剂（ＮＳＢＢ）与增加肝硬化及难治性腹水　患者死亡率相关。而其他一些证据表明，ＮＳＢＢ可通过减少细菌异位从而使肝硬化及难治性腹水患者获益。来　自英国伯明翰大学的Ｌｅｉｔｈｅａｄ　ＪＡ等进行了一项研究，旨在明确在等待肝移植的患者中，应用ＮＳＢＢ是否为终末　期慢性肝病及腹水患者死亡的危险因素。此研究是一个单中心回顾性分析，共纳入了从２００７年１月至２０１１年　７月的３２２例等待肝移植的腹水患者。根据终末期肝病评分模型，１５９例使用ＮＳＢＢ患者与１６３例非使用ＮＳＢＢ　患者相比，肝细胞癌与难治性腹水的发生率相近（３５．２％ｖｓ　３７．４％，Ｐ＝０．６８１）。３２２例患者中有８２例死亡，　２２１例患者接受肝移植，在中位数为７２　ｄ的随访期间内有１９名患者被剔除；ＮＳＢＢ组和非ＮＳＢＢ组的中位生存　期分别为１５０　ｄ和５４　ｄ。在多变量Ｃｏｘ风险模型中，相较于倾向风险得分匹配的非ＮＳＢＢ组，ＮＳＢＢ组可降低死　亡率（ＨＲ＝０．５５；９５％ＣＩ：０．３２～０．９５，Ｐ＝０．０３２）。在１ｌ７例难治性腹水亚组中，ＮＳＢＢ与减少等待期间的死　亡率独立相关（调整后ＨＲ＝０．３５；９５％ＣＩ：０．１４～０．８６，Ｐ＝０．０２２）。ＮＳＢＢ对于等待肝移植合并腹水或难治　性腹水的患者并非有害，反而与减少等待期间的死亡相关。这项研究结果表明ＮＳＢＢ不仅安全，且可能对终末　期肝病合并腹水的患者有益。　（吉林大学第一医院肝病科王承芯赵旭报道）