丹七片的研究进展
2020-03-21
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中国民族民间医药2017年6月第26卷第12期Chin ̄J0urnal 0f EtIlIlo珊edicine aIldI Eth 。pharIImcy,2ol7,v0126,Nn12 ..37. 文献综述 丹七片的研究进展 蒋秋香 柳州食品药品检验所,广西柳州545 ̄6 【摘要1 丹七片具有活血化瘀、通脉止痛的功效,是活血化瘀类药物的代表药,临床应用广泛,其质量关系到用 药的安全性和有效性。笔者通过查阅中国知网、万方及维普等数据库,对200l~2015年涉及丹七片的制备工艺、显微鉴 别、薄层色谱鉴别、含量测定、指纹图谱、药理作用及临床应用等方面的36篇文献进行分析、归纳和整理,以期为丹七片 的质量评价及开发应用提供参考和依据。 【关键词】 丹七片;鉴别;含量测定;指纹图谱;药理作用;研究进展 【中图分类号】R286.0 【文献标志码】A 【文章编号】1Oo7—8517(2017)12—0037—04 丹七片由丹参和三七两味中药组成,具有活 有效成分外,还有淀粉、糖类、黏液质、蛋白质 血化瘀、通脉止痛的功效,用于瘀血闭阻所致的 等,这些物质多具有一定的粘性,给制粒带来影 胸痹心痛、眩晕头痛、经期腹痛。其制法是将三 响。韩超等 应用流化床制粒技术,改善颗粒的 七粉碎成细粉,丹参经水煮、滤过、浓缩、加入 溶解度、孔隙率、比表面积,降低能耗、减少物 三七细粉及淀粉、糊精,压片,包衣即得。现行 料损失,提高处方中不稳定成分的稳定性,并通 版质量标准是《中国药典》2015年版一部¨],其 过正交试验法,筛选丹七片流化床制粒工艺参数, 中规定了丹七片的处方、制法、性状、鉴别、检 形成最佳制粒工艺。丹七片压片后,可包糖衣或 查、含量测定、功能与主治、用法与用量、注意、 薄膜衣,按照传统的包糖衣技术,各个批次之间 规格和贮藏。目前国内有41个不同的厂家生产丹 的包衣厚度、色泽等差异较大。肖晏婴等 改进 七片,涉及的地域宽广,原料药材来源和品种多 包糖衣工艺,使包衣工序的每个操作环节都有量 样化。为了更好地控制丹七片的质量,为临床合 化标准:粉衣层包15层,糖衣层8层,有色糖衣 理应用提供科学依据,笔者对丹七片的质量研究、 层8层,从而保证该制剂质量均一,外形美观。 药理作用及临床应用进行综述,为丹七片质量评 2定性鉴别 价研究及临床用药安全提供参考。 2.1显微鉴别根据《卫生部药品标准中药成方 1制备工艺 制剂》 规定,鉴别丹七片中三七的方法为显微鉴 《中国药典》收载的丹七片由丹参和三七组 别,其鉴别主要对象为淀粉粒。2010年版药典 将 成:丹参通过水煎煮,滤液浓缩,再加入三七细 显微特征鉴别对象定为含黄色分泌物的三七树脂道 粉,混匀,干燥,压片。丹参的主要活性成分有 碎片。现行版药典 规定的显微鉴别也是三七树脂 水溶性的丹酚酸类化合物及脂溶性的丹参酮类化 道碎片。 合物,其中丹酚酸B在丹参根中含量最高 J,水 2.2薄层色谱鉴别在已有的研究丹七片质量标准 B ,薄层色谱鉴别法作为主要的鉴 提转化率较高,但是脂溶性成分提取不充分。岳 的文献报道中l国超等 将丹七片的工艺进行了改进:将丹参分 别方法被采用。其中三七的有效成分三七皂苷R1、 别用90%乙醇6倍量提取1h、4倍量提取0.5h, 人参皂苷Rgl、人参皂苷Rb1作为主要的鉴别对象,浓缩之后加三七细粉,混匀,干燥,压片。按高 通过“取样品,加水lmL,搅匀,再加以水饱和的 效液相色谱法,对原工艺和改进后工艺生产的各3 正丁醇8mL,密塞,振摇10 n,放置2h,离心,批丹七片进行丹参酮IIA含量的测定,结果显示, 改进工艺后,丹参酮IIA的含量较原工艺提高了 4.1~5.2倍。制粒过程在片剂的制备工艺中是非 常关键的步骤,因中药成分非常复杂,浸膏中除 取上清液,加正丁醇饱和的水25mL,摇匀,取正丁 醇层,蒸干,残渣加甲醇lmL使溶解,作为供试品 溶液”等步骤提取,薄层板为硅胶G板,展开剂有 正丁醇一乙酸乙酯一水(4:1:5)的上层溶液 、三 作者简介:蒋秋香(1983一),女,汉族,本科,在职研究生,主管中药师,研究方向为药品、食品、化妆品、保健 食品的检验和标准研究。E—mml:6737 ̄82@qq.tom 38・ lll旧 族民I'liJJ 约2017 4t-6 第26巷第l2期Chi,. lJllllrmiI”f Ethnomedic-ine and Ethnophal『Ilat-Y,2017,V01.26, 12 氯}}{烷一乙酸乙酯一f11 一水(15:40:23:10)在 10 以下放置的下层溶液…、l,2一二氯甲烷一正 "系统和I 色剂与 述鉴别丹参水溶性成分 斗酚 肢B的报道卡H㈨ 3含量测定 _r醇一 醇一水(6:8:3:5)的下 溶液(溥层色谱 I划 图1) 等 也有 究行 通过“取样品, 【{]醇30mI ,超声处理45rail・,滤过,滤液蒸于,残 渣lJJIl水20mL溶解,,【_}j稀盐酸i』IIiJ H1J-ptl值约为2,用 醋酸乙酯2OraL振摇提取,卉 醋酸乙酯液,水层 3一 L |-l_L为h加科植物 L Pan“ notogin— seng(Bm’k.)F.H.Chen的干燥 和1根茎 , 成 以水饱和 丁醇萃取2次,饵次30ni1 ,合并』I三丁醇 液, 用氮试液40mL洗涤,分取lJ 丁醇液,以水 分复杂多样,目前已确定的成分仃 余利,,其中有 效成分以鬯苷类和三七素类为主。 。L作为丹匕 片的-咪主约,现行版质量标准 规定,将丹七片 40m1 洗涤2次,弃去水液,蕉 残渣』JII甲醇1mL 使溶解,作为供试品溶液”提取,展丁r剂为氯仿一 乙酸乙哺一 醇一水(15:40:22:l0)10oc以下放置 12t1的卜 溶液.显色利为10c ̄硫酸乙醇溶液,在 105 ̄C JJu热至斑点显色消晰,分别 日光和紫外光灯 卜愉视, _j对照品l十『l 的佗 I . 棚同颜色的 斑点千¨荧光斑点 对1-坩参的搭别方法十H对较少, 彬彬等“ 朋以下方法提取:取样品,加水20mL, 超声处珲20min,加稀盐酸iJIlll= I H值至3~4,用乙 醚提取3次,每次20niI , 许乙醚液,川无水硫酸 钠脱水,挥干,残渣加尢水乙醇1n I 使溶斛.作为 供试。 溶液,』1 参对照药材做If订样处理。薄层板使 用硅胶GF254板,以 一■,蘸…烷一乙酸乙酯一 I{】l醇一tlt酸(2:3:4:0.5:2) 展开剂,于紫外光 254nm下愉视,在与丹参埘照药材卡f{j 的位置_l 显 颜色的荧光斑点 钉 别坩参水溶性成分丹 酚酸B 0'J,-]tl道_ ,用70cA-乙醇趟卢处理提取之后, 滤过,蒸干,残渣加乙酸乙 溶解,跟坩酚酸B对 照 点于 一硅胶G 板} ,以乙酸丁酯一水一 酸(14:2:3)的上层溶液腱外,喷以l%_t氯化铁 溶液与l%铁氰化钾溶液的等 混合溶液,在与丹 盼酸B相应的位置上, 十I J颜色的蓝色斑点(薄 层包}}譬图 图2) 2015年版药 鉴别(2)项下 规定,鉴. ̄llf、j-酚酸B的提取力‘法为70%乙醇趟声提 取之后,滤过,浓缩,作 供试r川容液,其薄层板、 豳 : 二 3 0 5 : 3 4 ::I~3川L』 样l ;4 L‘ 汁R1; J!H・l Jll(f i1)、 ¨酚酸B对照 fJl( 2);51]J J 州照溶液 图1 三七的薄层色谱图 图2丹参的薄层色谱图 样fl^用50% 醇超声提取30min,按高效液相色谱 法试验,任203nm波长下,以乙腑一水为流动相进 "悌度洗脱,测定 L的有效成分 Ll :fj:Rl、人 参r }:Rgl和人参皂苷Rbl的总:t,每片不得少于 2 0mg梁少强等 进行的丹L片质厶±标准研究 tI1, L的主要成分三llL皂苷Rl、人参 也苷Rgl和 人参r己f1:Rbl作为研究的目标成分,川50%甲醇超 提取,使刚高效液相色谱法,愉测波长为203nm, 以乙腑一水为流动相梯度洗脱分离,洲定(i高效液 州色谱I欠J 3)。孙英英等 也采用50% 醇超 提取的办法,以乙腈一水为流动卡fj,使用超高效 液卡IJ色潜法分离测定丹_L片中的 L 什R1、人参 f1:RgI f¨人参鬯苷Rl l,此方法能 6分钟内将 利If 测成分完全分离蔡向刚等 采用“取样 r 密』JIJ入水饱和的 丁醇5Ora1 ,密摩,称定重 {| ,超声处胖30min,放冷,称定币=最,用水饱和 的I卜r孵补足减失的重 ,摇匀,滤过,精密量取 续滤液lOm1 ,置分液漏斗中,加氲试液洗涤2次, 次lOmI ,取正丁醇液,蒸干,戏渣加lf{醇使溶 解,转移全lOmL世瓶巾,加 刻度,摇匀, 滤过,取续滤液, 得。”提取丹L片lfl的二三L皂苷 }{1干¨人参 fj:Rgl,以乙腈一水一磷酸为流动l干臼, 刈‘ L 苷I l和人参皂忤Rgl进行分离测定 也 仃进行 独的人参皂苜Rgl含量的洲定 ,以 一水为流动相,将检测波长设为28%lln,进行洲 定 睃 果用HPLC—El SI)检测坩L片中人参 t f1:Rgl和人参皂 Rbl的含量,用乙脯一水为流 动 梯俊洗脱,漂移篱温度l1()c【=,载气流速 3.0mI/rn ,也能将人参皂苷Rgl秆1人参皂苷=Rb1 进行较 的分离榆测。 J ,、:: ’ :。 x : j 0 00 ∞ 帕,30 4 0 汁:1 L fi:R1;2人参‘ Rgl;3人参 f1:Rb 图3供试品溶液的HPLC图谱 中国民族民间医药2017年6月第26卷第12期Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethn0phaHn8cy,2017,Vo1.26,N 12 ・39・ 3.2丹参丹参为唇形科植物丹参Salvia miltior- Bge.的干燥根和根茎_1 J。其化学成分主要 有脂溶性和水溶性成分两大类。丹七片的现行版 质量标准中只有丹参的水溶性成分丹酚酸B的薄 层色谱鉴别要求,无含量测定标准。但是丹酚酸 B的含量测定方法已有文献报道,其提取方法多 样:(1)取样品0.25g,加水10mL溶解,用稀 盐酸调节pH至1—2,乙酸乙酯萃取3次,每次 20mL,合并萃取液并蒸干,残渣用75%甲醇溶 解至10mL,再吸取1mL至10mL量瓶中,加 75%甲醇稀释至刻度 。(2)取样品0.3g,加 50%乙醇25mL,超声处理30min,过滤,即 得-l 。(3)取样品0.15g,置25mL量瓶中, 加水适量,超声处理20min,用水定容至刻度, 即得 J。(4)取样品0.1g,加75%甲醇50mL, 加热回流lh,过滤,即得_1。。。但高效液相色谱 条件基本一致:流动相组成为甲醇一乙腈一甲酸 一水,检测波长286nm。丹参的水溶性成分除了 丹酚酸B外,目前已知的还有丹参素和原儿茶 醛 ,骆秀平等 。 将丹七片样品经过甲醇超声 提取,使用高效液相色谱法,检测波长280nm, 以甲醇一1.5%冰醋酸水溶液为流动相,分离测 定原儿茶醛。但是梁民琦 使用的提取方法跟原 儿茶醛的水溶性性质更相符:取样品5g,加水 50mL,超声处理30min,滤过,取滤液25mL, 用稀盐酸调pH至2.2,用水饱和的醋酸乙酯提取 4次(20、2O、15、10mL),合并醋酸乙酯液, 蒸干,残渣用甲醇溶解,即得,其使用的流动相 为甲醇一0.2mol・L 醋酸铵(用HC1调pH至 2.2),检测波长313nm。对于丹参素的测定,魏 淑萍 将样品用50%乙醇超声提取30min,使用 高效液相色谱法,在280nm波长下,以乙腈一水 一磷酸将丹参素分离测定。而潘锋 刮将丹七片样 品用10%甲醇溶液超声提取30min,在高效液相 色谱条件下,检测波长为281nm,使用甲醇一 1%醋酸溶液能将丹参素与原儿茶醛同时分离 检测。 4指纹图谱研究 郑文忠等 将丹七片样品经75%甲醇超声处 理30min提取后,使用高效液相色谱法,在210nm 的波长下检测,以乙腈一0.06%磷酸溶液进行梯度 洗脱,对10批次的丹七片样品进样分析,采集色 谱图,建立指纹图谱,得到1O个共有峰,以“中 药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)”进行 相似度计算,结果发现1O批次的丹七片相似度均 在0.90以上(见图4)。 II‘曩 注:sl_丹参素钠对照品;s2.原儿茶醛对照品; s3谜迭香酸对照品;s4.紫草酸对照品; S5.人参皂苷Rg1对照品;S6.丹酚酸B对照品; s7.人参皂苷Rbl对照品;S8.丹参阴性对照品; s9.三七阴性对照品;S1O.丹七片供试品。 图4 10批丹七片HPLC指纹图谱 5药理作用和临床应用 徐懿乔等 以家兔和大鼠为实验对象,发现 丹七片可明显抑制由凝血酶和胶原蛋白诱导的血 小板聚集,可升高凝血酶作用下的血小板内cAMP 含量。丹七片作为活血化瘀类药物的代表在临床 心脑血管疾病治疗中应用广泛,郭淑贞等 采用 心血管系统与人类最为接近的小型猪作为实验动 物,为丹七片干预心肌缺血的作用机制阐释了新 的线索与证据。在有效控制冠状动脉粥样硬化的 发生和发展、减轻或消除冠心病病人的临床症状 和降低血脂方面,丹七片是一种理想的药品选 择l3。-33]。王玉龙等 根据自发性高血压大鼠 (SHR)和正常WKY大鼠尿液的代谢组学差异, 研究丹七片对SHR血压及尿液中差异性代谢物的 影响,发现丹七片可降低SHR血压,且可通过干 预SHR尿液中与高血压发生相关的差异性代谢物 分布状态来达到治疗高血压的作用。此外,在与 复明片联合用药后,对原发性开角型青光眼的治 疗具有更佳的临床疗效,值得临床推广应用 珀 。 6结语 丹七片具有活血化瘀、通脉止痛的功效,常 用于冠心病、动脉粥样硬化、高脂血症的治疗。 丹七片中的三七和丹参皆为常用中药,方中丹参 味苦性微寒,善于活血祛瘀、凉血消肿、清心除 烦,三七味甘微苦、性温,功擅活血祛瘀、消肿 定痛。药典收载的丹七片规定了三七的显微鉴别, 丹酚酸B、三七皂苷R1、人参皂苷Rgl和人参皂 苷Rbl的薄层色谱鉴别,三七皂苷Rl、人参皂苷 Rgl和人参皂苷Rbl的含量测定,但是,因三七、 -40・ 中国民族民间医药2017年6月第26卷第l2期Chinese Jounarl of Ethnomedicine and Ethnopharmaey,2017,Vo1.26,No.12 [17]应佳,包玮鹫,李冰岚,等.HPLC测定丹七片中人参 丹参种质资源复杂,不同地区采收时间各异,其 他成分的含量也各有不同,仅凭现有的质量标准 控制,并不能较好的反映药材和制剂的品质与疗 效。另外,药典上规定的制法工艺要求丹参水煎 煮3次,煎液滤过,浓缩之后入药,与三七细粉直 皂苷Rgl的含量[J].中成药,2007,29(8):21. [18]殷召军.HPLC—ELSD测定丹七片中人参皂苷Rgl和 人参皂苷Rbl含量[J].内蒙古中医药,2010,9 (21):126. 接入药相比,其工艺相对复杂,这给一些不法厂 家有机可乘,若将丹参直接以细粉入药,以现有 的定性定量质量标准检测,无法判定其制作工艺 的合法性。因此,笔者考虑是否能将“异性有机 物”的检查也纳人丹七片的质量标准控制项目, 即除三七原药材组织外,不得检出其它植物组织, 这也是笔者下一步将继续探索的课题。 参考文献 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(2015年版一 部)[S].北京:中国医药科技出版社,2015:676. [2]肖培根.新编中药志[M].北京:化学工业出版社, 2002:212. [3]岳国超,焦玉.丹七片制备工艺改进[J].湖北中医 杂志,2011,33(12):68. [4]韩超,马琳.正交设计法研究丹七片流化床制粒工艺 [J].陕西中医,2009,30(3):343. [5]肖晏婴,黄德红,王洪军.丹七片包糖衣工艺改进 [J].湖北中医杂志,2015,37(1):70. [6]卫生部药典委员会编.卫生部药品标准中药成方制剂 (第1册)[M].北京:人民卫生出版社,1989:48. [7]国家药典委员会.中华人民共和国药典(2010年版第一 增补本)[S].北京:中国医药科技出版社,2010:14. [8]黄玉芍.丹七片(胶囊)的薄层色谱鉴别[J].时珍 国医国药,2001,12(4):339. [9]郝自新,程世云,张正虎.丹七片质量标准研究[J]. 安徽医药,2009,13(11):1329. [10]冯彬彬,张建海,祝慧凤.丹七片的质量标准研究 [J].浙江中医药大学学报,2010,34(1):84. [11]梁少强,谢仕伟,李国荣.丹七片质量标准的研究 [J].中国医药指南,2009,7(24):57. [12]廖名爱.丹七片质量标准研究[J].中国药业, 2010,19(10):28. [13]夏鹏国,张顺仓,梁宇锁,等.三七化学成分的研究 历程和概况[J].中草药,2014,45(17):2564. [14]孙英英,郭玉海,林华庆,等.UPLC测定丹七片中 三七皂苷R1、人参皂苷Rgl和人参皂苷Rbl的含量 [J].中国生化药物杂志,2015,35(1):148. [15]蔡向阳,夏金华.RP—HPLC法同时测定丹七片中三 七皂苷R1和人参皂苷Rgl的含量[J].中国药房, 2007,18(36):2837. [16]金银芝,金朝阳,应佳.HPLC测定丹七片中丹七片 中人参皂苷Rgl的含量[J].浙江中医药大学学报, 2009,33(6):884. [19]夏明.RP—HPLC法测定丹七片中丹酚酸B的含量 [J].中华中医药杂志,2010,25(11):1880. [20]黄湘,刘丹,文萍.HPLC测定丹七片中丹酚酸B的 含量[J].现代中药研究与实践,2007,21(6):43. [21]席仲洪,胡仁胜,帅银花,等.丹七片中丹酚酸B的 含量测定[J].江西中医药,2007,38(4):62. [22]赵艳威,杨宣,董璨珠,等.丹参素及原儿茶醛研究 进展[J].武警医学院学报,2009,18(3):260. [23]骆秀平,王术玲,郑艳平.HPLC法测定丹七片中原儿 茶醛的含量[J].中药新药与临床药理,2005,16 (2):130. [24]梁民琦.丹七片中原儿茶醛的含量测定[J].中国临 床药学杂志,2005,14(3):186. [25]魏淑萍.HPLC法测定丹七片中丹参素的含量[J]. 辽宁中医杂志,2005,32(5):472. [26]潘锋.HPLC同时测定丹七片中丹参素和原儿茶醛的 含量[J].药物分析杂志,2006,26(4):531. [27]郑文忠,邓红,林华庆,等.丹七片HPLC指纹图谱 [J].中国实验方剂学杂志,2014,20(1O):80. [28]徐懿乔,刘杰,谢笑龙.丹七片对动物血小板聚集的 抑制作用及其机制研究[J].华西药学杂志,2012, 27(3):267. [29]郭淑贞,啜文静,王勇,等.丹七片干预心肌缺血 的血浆蛋白质组学研究[J].中西医结合心脑血管病 杂志,2014,12(11):1355. [30]龚道凯,张学敏.丹七片治疗冠心病的临床观察 [J].中国民族民间医药,2009,18(21):125. [31]高静民,马莉.丹七片治疗高脂血症及预防动脉粥样 硬化[J].首都医药,2004,10(2):43. [32]龙军.丹七片对冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血脂 代谢的影响[J].中国药业,2015,24(24):36. [33]张延华,沈凌霞,马成兰.丹七片治疗冠状动脉粥样硬 化性心脏病28例[J].中国药业,2016,25(2):112. [34]王玉龙,吕光耀,王娅妮,等.基于1H—NMR的丹 七片对自发性高血压大鼠尿液代谢组学分析[J].中 国实验方剂学杂志,2017,23(4):102. [35]付禄新.复明片与丹七片联合治疗原发性开角型青光 眼临床观察研究[J].中国卫生产业,2013,10 (19):91. [36]魏红,王慧博.复明片与丹七片联合治疗原发性开角 型青光眼临床观察[J].中国中医急症,2010,19 (6):947. (收稿日期:2017~04—10编辑:陶希睿)