（时间：60分钟 满分：100分）
一、选择题（每小题2.5分，共50分）
1．实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线（3条线均与下图中的链霉素带接触），将平板置于37 ℃条件下恒温培养3 d，结果如下图所示。从实验结果分析以下叙述，不正确的是（ ）
A．链霉素能阻止结核菌的生长 B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效 C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效 D．链霉素可以用于治疗伤寒病人
2．下面是鉴别纤维素分解菌的培养基，根据你的判断，鉴别纤维素分解菌的现象应是（ ）
羧甲基纤维素钠 酵母膏 KH2PO4 琼脂 土豆汁 用蒸馏水定容到1 000 mL A.在液体培养基中有微生物存活 B．在固体培养基的表面有菌落的形成
C．加入刚果红溶液，在固体培养基上有透明圈形成 D．培养基的表面有细菌进行细胞分裂
3．下面对发酵过程中灭菌的理解不正确的是（ ） A．防止杂菌污染 B．消灭杂菌
C．培养基和发酵设备都必须灭菌 D．灭菌必须在接种前
5～10 g 1 g 0.25 g 15 g 100 mL 4．利用酵母菌发酵生产酒精时，投放的适宜原料和在产生酒精阶段要控制的必要条件分别是（ ）
A．玉米粉和有氧 B．大豆粉和有氧 C．玉米粉和无氧 D．大豆粉和无氧
5．（2014·天津高考理综）MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如下表。下列说法正确的是（ ）
组别 1 2 3 培养基中的添加物 100 μg/mL蛋白质H 20 μg/mL青霉素 MRSA菌 生长正常 生长正常 2 μg/mL青霉素＋100 μg/mL蛋白质H 死亡 A.细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定的 B．第2组和第3组对比表明，使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA菌 C．实验还需设计用2 μg/mL青霉素做处理的对照组 D．蛋白质H有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素
6．在连续发酵先后制得杨梅酒和杨梅醋的过程中，某物质的浓度变化如下图所示。该物质可能是（ ）
A．乙酸 B．酒精
C．二氧化碳 D．葡萄糖
7．下图表示各种因素对醋酸菌发酵产生醋酸的影响，其中不正确的是（ ）
8．酒厂利用酵母菌酿酒过程中，经检测活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是（ ）
A．降低温度 B．隔绝空气 C．加缓冲液 D．加新鲜培养基
9．下列关于发酵产物检验的说法，错误的是（ ） A．果汁发酵是否产生酒精可以用重铬酸钾来检验 B．检验醋酸产生的简单易行的方法是闻气味
C．泡菜制作产生的亚硝酸盐可以用对氨基苯磺酸和盐酸萘乙二胺检验 D．检验乳酸产生的简单易行的方法是品尝
10．某同学为了研究酵母菌呼吸作用的特点，制作了如下图所示实验装置。甲、乙中加等量的经煮沸后冷却的葡萄糖溶液，并加等量的酵母菌，乙内用液体石蜡隔绝空气。对该实验分析，正确的是（ ）
A．该实验将以有无CO2的产生来判断酵母菌的呼吸作用类型 B．实验预期：无论经过多长时间，甲内都无酒精产生
C．乙和甲比较，说明酵母菌在不同的条件下有不同的呼吸作用类型 D．乙为甲的空白对照实验，以排除无关因素对酵母菌呼吸作用的影响
11．下图曲线表示的是温度和果胶酶活性之间的关系，此曲线不能说明的是（ ）
A．在B点之前，果胶酶的活性和温度呈正相关
B．当温度达到B点时，果胶酶的活性最高，酶的催化作用最强
C. A点时，果胶酶的活性很低，但随着温度升高，果胶酶的活性可以上升 D. C点时，果胶酶的活性很低，当温度降低时，酶的活性可以恢复上升 12．加酶洗衣粉能够除去衣物上的奶渍和血渍，主要是因为它含有（ ） A．脂肪酶 B．蛋白酶 C．淀粉酶 D．氧化酶
13．下图为四位同学选择不同温度范围进行的“探究温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响”的实验结果，其中选择温度范围最合理的是（ ）
A．① B．② C．③ D．④
14．随着生物技术的发展，酶在社会生产、生活中的应用越来越广泛。下列说法错误的是（ ）
A．利用酶生产某些化工产品，能显著降低能耗、减少污染，节约成本 B. “加酶洗衣粉”的洗涤效果与水温、酸碱度有关，与污物或衣物的性质无关 C．用于治疗消化不良症的肠溶多酶片含有多种消化酶，但嚼服后会失去疗效 D．要较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应保存在低温的条件下
15．在观察果胶酶对苹果匀浆的作用的实验中，将苹果匀浆放在90 ℃恒温水中保温4 min，其目的是（ ）
A．杀灭苹果匀浆中的微生物 B．使果胶分解，从而提高出汁率
C．使果胶酶变性失活，以排除对实验的干扰 D．果胶酶的最适温度为90 ℃，酶的活性最高
16．变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏，双链解开，但共价键并未断裂。引起变性的因素很多，升高温度、过酸、过碱以及加入变性剂等都能造成核酸变性。PCR的反应过程中，引起变性的因素是（ ）
A．pH过高 B．pH过低
C．升高温度 D．加入酒精
17．下列关于DNA复制的叙述，正确的是（ ）
A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的5′端延伸DNA链 B. DNA复制不需要引物
C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合 D. DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸 18．下列有关PCR技术的叙述，错误的是（ ） A．PCR技术一定需要解旋酶和DNA聚合酶
B. DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从引物的3′端延伸DNA链 C. PCR的引物的基本单位是脱氧核苷酸或核糖核苷酸 D．扩增DNA时，需要加入两种引物
19．为获得纯合高蔓抗病番茄植株，采用了下图所示的方法，图中两对相对性状独立遗
传。据图分析，不正确的是（ ）
A．过程①的自交代数越多，纯合高蔓抗病植株的比例越高 B．过程②可以取任一植株的适宜花药作培养材料 C．过程③包括脱分化和再分化两个过程 D．图中筛选过程不改变抗病基因频率
20．用培养液培养三种细菌，让它们在三支不同的试管中生长，下图显示了细菌的生长层，如果此时往三支试管中通入氧气，则细菌的繁殖速度将如何变化？（ ）
选择项 A B C D Ⅰ号试管 加快 减慢 加快 减慢 Ⅱ号试管 减慢 加快 减慢 加快 Ⅲ号试管 不变 加快 减慢 减慢 二、非选择题（共50分） 21．（10分）下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答相关问题。
（1）上述工作流程中①环节需要的微生物大多分布在____________的土壤环境中，要从土壤中分离获取这种微生物，应采用具有________的培养基，培养基中的碳源为________。为了筛选出微生物，还应向培养基中加入________染料。
（2）从生物体提取的酶首先要检测________，以便更好地将酶用于生产实践，衡量此酶这一指标可用____________________________表示。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用________技术。
（3）生产中可以满足④环节的常见菌种是________，④过程要注意对接种器材进行________。为了确保⑤环节成功，后期的发酵装置要保证________条件。
22．（8分）某班同学用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒，其简要流程如下：
（1）实验过程中，该小组同学发现榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是____________。 （2）分离酵母菌应使用________培养基，固定化酵母细胞常采用________法，若想使这些酵母细胞能反复使用，实验过程中一定要注意____________。
（3）在酸性条件下，可用________来检测发酵产物中是否有酒精产生。若想进一步检测所得果酒中酵母菌的密度，可采用__________________法。
（4）另一个班的同学用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，请分析出现酸味的原因：_________________________________________________
__________________________________________________。
23．（8分）为了探究6BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。
培养基编号 1 2 3 4 回答下列问题。 （1）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为________和________两类。上述培养基中，6BA属于________类生长调节剂。
（2）在该实验中，自变量是______________________________________，因变量是______________________________________，自变量的取值范围是______________。
（3）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是________号培养基。
（4）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入________（填“6BA”或“IAA”）。 24．（12分）加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。请回答下列问题。
0.5 浓度/mg·L 6BA IAA 0 0.1 0.2 0.5 －1m/% 76.7 77.4 66.7 60.0 n/个 3.1 6.1 5.3 5.0
（1）为了探究某加酶洗衣粉中碱性蛋白酶含量与洗涤效果的关系，某同学通过实验获得上图所示的结果。由图可知，加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是________%，本实验的自变量是
________________________________________________________________________。
（2）下表是围绕加酶洗衣粉的一项研究结果：
温度/℃ 普通洗衣粉去污力/% 加酶洗衣粉去污力/% 上述实验结果可以得出的结论有： ①________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________； ②________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 （3）在使用加酶洗衣粉过程中，对于特别脏的衣服、较大的洗衣量，写出两项提高洗涤效果的措施：①____________；②____________。
25．（2014·江苏高考）（12分）为了获得β-胡萝卜素产品，某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题。
（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是_____________________________________ __________；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该________________。
（2）为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是________________________。 （3）下图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是______。（填序号）
20 15 30 30 18 40 40 20 48 45 21 50 50 21.5 48 60 22 37
①安全阀、放气阀、压力表 ②放气阀、安全阀、压力表 ③安全阀、放气阀、温度表 ④放气阀、安全阀、温度表
（4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是_________________________________________
________________________________________________________________________。
（5）为增加β-胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是__________ ______________；研磨时______（填“需要”或“不需要”）添加CaCO3，理由是________________________。
参考答案
1．解析：由题图可以知道链霉素对3种细菌的抗生素效应，链霉素对结核菌的生长繁殖抑制作用最强，其次对霍乱菌有效，对伤寒菌没有抑制作用，故链霉素不能用于治疗伤寒病人。
答案：D
2．解析：该培养基是含有丰富天然有机营养成分的固体培养基。不仅有分解纤维素的微生物的生长，还有其他微生物的生长，它们都能形成相应的菌落，但只有能分解纤维素的微生物，用刚果红溶液染色，能在其菌落周围出现透明圈，而其他微生物的菌落周围因为没有纤维素的分解，不能形成透明圈。
答案：C
3．解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A项说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；B项是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物；C项是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；D项是正确的，发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。
答案：B 4．答案：C
5．解析：本题考查实验方案设计及真、原核生物区别等知识。细菌属于原核生物，没有核膜包被的细胞核，故A项错误。第2组和第3组对比，实验变量不唯一，不能说明低浓度青霉素有杀死MRSA菌的作用，应是青霉素与蛋白质H共同起作用。若要证明这一点，需设计用2 μg/mL青霉素单独作用的对照组。故B项错误，C项正确。该实验设计和结果不能证明蛋白质H有很强的杀菌作用，故D项错误。
答案：C 6．答案：B
7．解析：温度和pH可以通过影响酶的活性来改变醋酸的产生速率，在最适温度时产生速率最大，高于或低于该点都会使酶的活性降低（温度过高酶活性丧失）。醋酸菌是好氧细菌，随着溶氧量的增加（一定范围内），以及该菌生长繁殖速率的加快，醋酸的产生速率也会增加，但当溶氧量增大到一定值时，由于受其他条件的限制，醋酸产生速率不可能继续增加。醋酸产生速率在一定阶段不断加快，当活菌数目达到最多（稳定期）时，其产物总量会继续增加，而产生速率则不再明显加快。
答案：C
8．解析：酵母菌有氧呼吸产物为CO2和H2O，无氧呼吸产物是CO2和C2H5OH。酵母菌数量适宜但不产生酒精，说明没有隔绝空气。
答案：B
9．解析：发酵产物的鉴定不可用品尝方法，以防有毒。检验乳酸的产生是用pH试纸鉴定。
答案：D
10．解析：本题为一对照实验，该实验的单一变量是氧气，石蜡所起的作用是隔绝空气，所以该实验探究的是酵母菌在不同条件下的呼吸作用类型。酵母菌在有氧和无氧条件下都会产生CO2，甲内氧气耗尽时会产生酒精，D项中乙应为条件对照。
答案：C
11．解析：从图中可以看出随着温度的不断升高，果胶酶的活性在上升，当温度达到B点时，酶的活性达到最高；随后，随着温度的继续上升，酶的活性迅速下降。A点和C点相比，虽然酶的活性都很低，但是A点是低温条件，对酶的分子结构无影响，所以随着温度的上升，其活性也会不断上升，C点是高温条件，当温度过高时，会破坏酶的分子结构，使酶的活性发生不可逆的变化。
答案：D
12．解析：奶渍和血渍的主要成分是蛋白质，所以应考虑到洗衣粉中添加的是蛋白酶。 答案：B
13．解析：由图可知，①选择的温度范围过高，③④选择的温度范围过低，都不能得到最适温度的范围。
答案：B
14．解析：酶制剂的活性受温度、酸碱度等条件的影响，在适宜条件下洗涤效果比较好，同时污物或衣物的性质也会影响酶活性的发挥。
答案：B
15．解析：本实验属于对照实验，其实验目的是证明果胶酶能将果胶分解。因此，首先对苹果匀浆进行加热处理，使苹果匀浆中的果胶酶变性失活，然后再分别加入果胶酶和等量的煮沸过的果胶酶，观察实验现象，加入果胶酶的匀浆澄清度高且澄清时间短，证明果胶酶能将果胶分解。
答案：C
16．解析：各选项的条件均能导致DNA分子变性，但在PCR反应中，变性后还要进行退火和延伸等过程，过酸、过碱、酒精等能够导致反应过程中的酶变性失活，使DNA扩增不能进行，而PCR反应中的DNA聚合酶是耐热的，所以可选用升高温度使DNA变性。
答案：C
17．解析：只认为B项错误的原因是没有理解DNA复制过程以及DNA聚合酶的作用特点。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3′端延伸DNA链。由于模板链首先复制的是3′端，即复制方向3′→5′，而DNA分子是反向平行的，子链是依据碱基互补配对原则，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向从子链的5′→3′。
答案：C
18．解析：在PCR技术中，用高温加热的方法使DNA变性即解旋，而不用解旋酶。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从引物的3′端延伸DNA。引物是一小段DNA或RNA，其基本单位是脱氧核苷酸或核糖核苷酸。DNA复制时以两条单链为模板，每条单链都需要引物，故需要两种引物。
答案：A
19．解析：过程①属于杂交育种。F2开始出现性状分离，筛选出高蔓抗病植株再连续自交筛选，可提高其纯合比例；过程②为单倍体育种，F1中取花粉，可以取任一植株的，因为任一植株基因型均相同。过程③为植物组织培养，包括脱分化与再分化过程。图中筛选过程在杂交育种和单倍体育种中代表将非高蔓抗病植株淘汰。在基因工程育种中代表抗病基因是否导入到受体细胞和导入的抗病基因在受体细胞中是否表达了。将表达出抗病的高蔓植株筛选出来，所以筛选过程改变了抗病基因的频率。
答案：D
20．解析：由题图可知，生长在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三支试管中的细菌分别为厌氧型、兼性厌氧型、好氧型，所以向三支试管通入氧气后，细菌的繁殖速度分别是减慢、加快、加快。
答案：B
21．解析：（1）①环节需要的微生物能产生纤维素酶，这样的微生物在富含纤维素的环境中较多，可用碳源为纤维素的选择培养基获得。为鉴定纤维素分解菌，可向培养基中加入刚果红染料，若存在纤维素分解菌，会产生透明圈。
（2）提取的酶要检测酶的活性。单位时间内产物的增加量或底物减少量可作为酶活性的指标。若要反复利用，可制成固定化酶。
（3）酒精发酵常用酵母菌无氧发酵。
答案：（1）富含纤维素 选择 纤维素 刚果红
（2）酶的活力（活性） 单位时间内产物的增加量（单位时间底物减少量） 固定化酶
（3）酵母菌 灭菌 无氧
22．解析：（1）果汁浑浊是因为含有果胶，可用果胶酶处理。
（2）分离酵母菌应使用选择培养基。固定化酵母细胞一般采用包埋法。若想使这些酵母细胞能反复使用，要注意无菌条件。
（3）酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。要检测酵母菌的密度（数量），用
涂布平板法计数菌落数。
（4）在有氧条件下，果酒可被醋酸菌氧化为醋酸。 答案：（1）用果胶酶处理
（2）选择 包埋 无菌条件（避免微生物的污染） （3）重铬酸钾 涂布平板法
（4）密封不严，其他微生物进行有氧呼吸，将果酒转变成果酸
23．解析：（1）根据植物的需求量，培养基中的元素分为大量元素和微量元素，6BA属于细胞分裂素类的植物生长调节剂。（2）实验中的自变量是IAA的浓度，因变量是再生丛芽外植体的比率和再生丛芽外植体上的丛芽平均数。自变量的取值范围在0～0.5 mg·L之间。（3）诱导丛芽的总数量为m与n的乘积，所以1号培养基最少。（4）6BA属于细胞分裂素，有利于芽的分化，抑制根的形成。
答案：（1）大量元素 微量元素 细胞分裂素
（2）IAA浓度 再生丛芽外植体的比率（m）和再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n） 0～0.5 mg·L
（3）1 （4）6BA
24．解析：考查加酶洗衣粉的洗涤效果的相关探究与分析。
（1）分析曲线，在碱性蛋白酶含量达到0.6%时去污力达到最高，再增加其含量去污力也不再增加，反而造成资源的浪费。自变量为坐标曲线的横坐标：碱性蛋白酶的含量。
（2）表中的结果纵向分析得出结论为：在相同温度条件下加酶洗衣粉的去污力比普通洗衣粉高；横向分析加酶洗衣粉的去污力则可知：45 ℃左右（或40～50 ℃）加酶洗衣粉的去污力最强。
（3）加酶洗衣粉的洗涤效果还受水温、浸泡时间、洗衣粉用量等方面的影响。因此可通过用温水浸泡，适当延长浸泡的时间，增加洗衣粉的用量等措施来提高洗涤效果。
答案：（1）0.6 碱性蛋白酶的含量
（2）①在相同温度条件下加酶洗衣粉的去污力比普通洗衣粉高 ②使用加酶洗衣粉时的适宜温度为45 ℃左右（或40～50 ℃）
（3）用温水浸泡、延长浸泡时间、增加洗衣粉的用量等（任选两项）
25．解析：本题考查微生物发酵产生代谢产物的相关知识。（1）培养皿常用的灭菌方法有干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法。为防止灭菌后器皿再次被污染，需在灭菌前先用牛皮纸或报纸包扎所要灭菌的器皿。
（2）青霉素是一种广谱性抗生素，它能抑制细菌细胞壁的形成。 （3）灭菌锅的结构：甲为安全阀，乙为放气阀，丙为压力表。
（4）各划线区均未见菌生长，说明此处无菌，无菌最可能的原因是接种环灭菌后未冷
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却，菌被杀死。
（5）根据叶片中色素的提取和分离实验可知，加入SiO2的目的是使研磨充分，加入CaCO3
的目的是防止叶绿素被破坏。Β-胡萝卜素比较耐酸，在弱酸性环境中不会被破坏，所以该实验不需要加入CaCO3。
答案：（1）干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） 用牛皮纸（报纸）包扎器皿 （2）抑制细菌（放线菌）生长 （3）①
（4）接种环温度过高，菌被杀死
（5）有助于研磨充分 不需要 β-胡萝卜素较耐酸
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