三．实验试剂：试剂一：DPPH试剂1mL×1瓶
试剂二：100μg/mL 维生素C标准溶液 20mL×1瓶 四．溶液配制：
试剂一：37℃平衡20min以上，待试剂融化后，在试剂瓶中加入100ml 95%乙醇或无水乙醇，剧烈震荡使试剂充分溶解。
注意：溶解一定要充分，如有条件可采用超声波助溶。
试剂二应用液：根据是否需要制作阳性对照标准曲线有两种配制方法。
1. 如仅需要将维生素C作为质控品，可取100μL 试剂二，加入900μL样品稀释液，充分混匀； 2. 如需测定维生素C的IC50，可分别移取0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0，5.0mL 试剂二于空离心管中，再依次加入10.0，9.5，9.0，8.5，8，7.5，7.0，6.0，5.0ml样品稀释液，充分混匀。配制成0，5，10，15，20，25，30，40，50 μg/mL 维生素C样品。 五．实验步骤: 试剂一（mL） 样品溶液（mL） 试剂二应用液（mL） 样品稀释液（mL） 空白孔1 1 1 测定孔 1 1 对照孔2 0 1 质控孔 1 1 充分混匀，室温避光静置30min使之充分反应。选用0.5mm比色皿3，517nm处测定吸光值。 六．清除能力计算：
氮(DPPH)自由基清除清除能力(%)=[空白孔吸光值-(测定孔吸光值-对照孔吸光值)]/空白孔吸光值*100% 七．注意事项：
1. 如样品中色素物质不是分析对象，建议先通过SEP C18柱进行脱色处理，处理后样品可不做对照孔；
2. 如不确定样品的氮自由基清除能力，可先做不同浓度的稀释液进行摸索，并选择适宜浓度进行测定，高浓度下，浓度与清除率间并不线性相关。
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