大型微生物学教学实验室的分区管理模式

２Ｏ１　７年１０月　教育教学论坛　Ｏｃｔ．２Ｏ１　７　第４２期　ＥＤＵＣＡＴＩＯＮ　ＴＥＡＣＨＩＮＧ　ＦＯＲＵＭ　ＮＯ．４２　大型微生物学教学实验室的分区管理模式　王雪涵　（北京城市学院中药与生物技术实验教学中心，北京１０００９４）　摘要：北京城市学院中药与生物技术实验教学中心微生物学实验室，是伴随招收生物技术专业、食品质量　与检测专业本科生而诞生的专业基础教学实验室。从本实验室教学任务繁重、教学过程中产生大量微生物污　染物的现象入手，阐明了生物安全防护的重要性和必要性。通过分析本实验室生物安全状况，不仅采取做好自　身防护、严格执行操作规程、保持室内清洁卫生等常规管理办法来保障教学活动的安全运行。还提出了全新的　微生物教学实验室分区管理模式。　关键词：分区管理；微生物教学实验室；生物安全　中图分类号：Ｇ６４２．０　文献标志码：Ａ　文章编号：１６７４—９３２４（２０１７）４２—０２７５—０２　微生物学实验教学的过程中会不可避免地产生　者对本室实施了分区管理模式。　大量的废弃物，容易对周边环境造成污染。微生物学　本室占地２４０余平方米，图１ａ为分区管理模式实　教学实验室是完成微生物学实验教学活动的特殊工　施之前的布局，展示了实验台等实验室家具和大型实　作环境，这一环境的安全是开展教学和科研活动的基　验仪器的摆放位置。如图，此时实验室的布局存在以　本保证【ｌｊ。严格规范实验操作，保持室内卫生及时消　下不合理之处：（１）实验室的出人口设置不合理，入口　毒，加强对菌株和试剂的管理，改善菌株保存环境，能　紧邻的Ｆ一恒温培养箱和Ｉ一冰箱是培养微生物和保藏　够有效减少微生物对实验人员的危害和对环境的污　菌种的场所，附近菌浓度较高，出口紧邻试剂柜和超　染，另外，能够保护实验材料不受污染，从而保证实验　净工作台，菌浓度较低，人员从人口至出口的路径容　的科学性。除上述常规安全管理方法外，还可通过对　易把微生物从菌浓度较高区域带至洁净度较高的区　微生物实验室进行合理的分区布局来减少微生物污　域，加大洁净区域污染的概率。（２）公共实验边台Ｂ１、　染，提高实验室的洁净度，有效防止检验过程中出现因　Ｂ２设置在实验室的两侧，用于培养基的配制和玻璃器　交叉污染而造成的“假阳性”和“假阴性”的结果翻。本文　皿等物的摆放，但未使用的器皿、无菌器皿、带菌器　根据实验室教学任务繁重、流动人员数量巨大的特点，　皿、灭菌后待洗涤的器皿和洗净后的器皿经常混杂摆　对实验室的进行分区管理模式，并取得了一定成效。　放，带菌器皿中的微生物若污染了无菌洁净器皿，将　一、分区管理实施前状况　严重污染后续实验。（３）高压蒸汽灭菌区域过于集中，　微生物学实验室是北京城市学院中药与生物技　微生物实验室主要有两大类需要灭菌的物品，一是实　术实验教学中心的专业基础实验室之一，承担着基础　验准备中需要将实验材料和玻璃仪器灭菌制成无菌　及专业微生物实验课５ｆｑ课程的教学任务，开设实验　材料和器皿，二是实验结束后将带菌培养物灭活以防　项目２０余个，平均每年完成１．２万人学时的教学工作　止污染环境，无菌器材及带菌物应相互隔离，避免在　量。　同一区域集中灭菌。　本实验室的教学任务非常繁重，以２０１４—２０１５夏　二、分区管理设计方案　季学期为例，周开展实验课程达２４学时，开展实验项　本室的建筑结构不适于建成带隔断的独立洗涤　目不少于５项，每周同时面向５个班级至少１５０个同学　室、准备室、无菌室和培养室等，只能根据各区域功能　开课，常常在同一天之内上午下午面向两个班级开设　实施分区管理模式，具体方案如图１ｂ所示：（１）将原出　２—４个实验项目。这种繁重的教学任务造成了如下现　入口位置对调，使从人口至出口方向按照从洁净区至　状：实验室流动人员数量巨大，排课过满，没有时间对　污染区即洁净程度排列，大大减少了污染物对洁净物　室内环境卫生进行彻底清理，无法及时对实验室进行　和洁净区的污染。（２）将公共实验边台Ｂ１、Ｂ２的功能进　紫外线消毒，带菌培养物需要等待学生观察结果，往　行细化，公共边台Ｂ１重新划分为Ｂ’一培养基配制区，　往放置较长时间才能灭菌处理。为改善这一困境，作　ｃ１’一灭菌区和Ｄ１’一洁净物品放置区。Ｂ’一培养基配制　收稿日期：２０１７—０３—２９　作者简介：王雪涵（１９８４一），女，辽宁大连人，博士学位，讲师，从事微生物耐药性基因研究。　－２７５－　２０１　７年１０月　教育教学论坛　ＥＤＵＣＡＴＩＯＮ　ＴＥＡＣＨＩＮＧ　Ｆ０ＲＵ卜１　Ｏｃｔ．２０１　７　Ｎ０．４２　第４２期　图１　北京城市学院微生物学实验室分区管理模式实施前后格局对比图　Ａ　试　ａ．分区管理模式实施之前的实验室布局　ｃ卜水槽　Ｂｌ一Ｂ２公捷边台　剂　柜　公基边台　Ｄ一学生实验台　Ｃ２－高压蒸汽灭菌锅　Ｆ～恒温培养箱　水槽　出【＝＝｜＝　Ａ’　Ｇ～超净工作台　Ｈ一讲台Ｉ　Ｉ～冰箱　入｝一】　试　ｂ．分区管理模式实施之后的实验室布局　Ｂ’－－培养基配制区　Ｅ１　一准备物晶洗刷区　Ｄ２’～带菌物品放置区　剂　陈　叭’一灭菌区　ＤＩ－－一洁净物品放置区　卜娃微观察区普通操作区　Ｅ２’～灭菌物晶洗删区　ｃ２　一污染物灭菌区　列　区　Ｇ’一培养区　入【：】　｝｛’一超净工作区　Ｉ’一讲台｛Ｊ’一菌种保藏隧　出［一｝　区与Ａ’一试剂陈列区距离较近，方便师生配制培养基；　示，有１瓶培养基变混浊，在分区管理实施之前，有３瓶　ｃ１’一灭菌区主要在实验准备中将实验材料和玻璃仪　变混浊，说明富含葡萄糖的液体培养基２０天中被污染　器灭菌制成无菌材料和器皿，可将在Ｂ’区配制的培养　的概率由１０％降至３．３％。　基就近灭菌；Ｄ１’一洁净物品放置区主要存放ｃ１’一灭　３．将５０套倒有普通琼脂培养基的无菌培养皿放在　菌区灭菌后的洁净器皿和洗涤干净后待用的器皿，也　实验室中适当位置，一周后观察平皿上是否有长有菌　摆放灭菌后待洗涤的器皿，但需另辟小块区域摆放并　落。结果显示，５０个培养平板中有两个出现菌落，菌落　注意对该区域进行频繁的表面消毒。将公共边台Ｂ２设　数量分别为１ＣＦＵ／ＩＫ和３ＣＦＵ／ＩＩＩＬ，实施分区管理之前的　置为Ｄ２’一带菌物品放置区，主要用于放置带菌培养　结果为５个平板长出菌落，菌落的数量为２—５ＣＦｕ／平　物、带菌玻璃器皿及其他带菌污染物。（３）将原布局中　皿不等。　的Ｅ一高压蒸汽灭菌锅区，分为ｃ１’一灭菌区和Ｃ２’一污　４．将２０个带有大肠杆菌纯培养的平皿放置于实验　染物灭菌区，ｃ２’一污染物灭菌区主要负责就近将Ｄ２’　室中，一周后观察是否污染杂菌。结果显示，纯培养平　带菌物品放置区存放的污染物和Ｇ’一培养区中取出　板有被污染的现象，肉眼可辨的杂菌菌落数共计　的废弃培养物进行高温灭菌。（４）将两个水槽分为Ｅ　１’　３ＣＦＵ，而分区管理之前为８ＣＦＵ。　准备物品洗刷区和Ｅ２’一灭菌物品洗刷区，前者用于　综上，微生物学实验室实施分区管理模式后，环　洗刷普通器皿，后者用于洗刷含有灭菌后污染物的玻　境污染程度大幅度降低，空气中菌浓度下降一半，洁　璃器皿，可就近洗￣Ｊ］Ｄ２’区放置的灭菌后待洗涤玻璃　净物及纯培养物被污染的现象也大大减少。　四、结语　器皿和从Ｃ２’一污染物灭菌区中取出的物品。　三、分区管理实施后效果　微生物教学实验室的生物安全问题关系师生生　实验室分区管理模式实施后，学生实验结果中纯　命安全和校园稳定，是摆在高校实验室管理人员面前　培养物染杂菌现象明显减少，为进一步证明分区管理　的一个重大问题，必须加强管理，重视预防和防护，提　模式的实施降低了室内空气中的菌浓度，减轻了环境　高实验人员的应急处理能力，确保实验室的生物安　污染，进行了以下实验：　全。另外，还需要转变观念，不仅注重实验室“硬件”建　１．沉降平皿法测定空气中微生物数量：将倒有普　设，还要强调“软件”管理在保障实验室生物安全方面　通琼脂培养基的无菌培养皿，打开皿盖计时５分钟，盖　的作用，要将两者有机地结合起来，将仪器配置、实验　上皿盖，同时做两个平行，３７￣１２培养２４ｈ后进行菌落计　室建筑布局等“硬件”与功能化分区管理相结合，创造　数并取平均值。实验结果显示，两皿平均菌落数为　出更加安全的实验教学环境。　　１４ＣＦＵ／Ｉ￣，实施分区管理之前为２９ＣＦＵ／ＩＩＩＩ，说明实施分　参考文献：［１］吕岫华，刘伟，刘巧丽，等．微生物教学实验室生物安全的探　区管理后，室内空气菌浓度下降至原来的一半左右。　２０１１，１０（３０）：９１—９４．　２．液体培养基污染情况检测：配制葡萄糖豆芽汁　索与研究卟装备管理，［２１ｉ＿ｖ－．－．浅谈药厂微生物实验室的设计与管理Ｕ］．工程工艺与　培养基分装３０瓶，高压蒸汽灭菌后，放置于实验室中　设备，２０１１，３５（２３７）：１３—１５．　适当位置，２０天后观察培养基变混浊的瓶数。结果显　一一Ｔｈｅ　Ｐａｒｔｉｔｉｏｎ　Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　Ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　Ａ　Ｌａｒｇｅ－ｓｃａｌｅ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　Ｔｅａｃｈｉｎｇ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ＷＡＮＧ　Ｘｕｅ－ｈａｎ　（Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　ＴＣＭ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇ－ｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｃｉｔｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００９４，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆＢｅｉｊｉｎｇ　Ｃｉｔｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　ＴＣＭ　ａｎｄ　ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｉｓ　ａ　ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ　ａｎｄ　ｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄ　ｃｏｕｒｓｅｔｅａｃｈｉｎｇ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ．Ａ　ｌａｒｇｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆｍｉｃｒｏｂｉｌ　ｃｏｎｔａａｍｉｎａｔｉｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｔｅａｃｈｉｎｇ．Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｉｓ　ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ，ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ　ｃｌａｒｉｆｉｅｓ　ｔｈｅ　ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ　ａｎｄ　ｎｅｃｅｓｓｉｙ　ｏｆ　ｔｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓａｆｅｔｙ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｔ　ｆｏｒｗａｒｄ　ａ　ｐａｒｔｉｔｉｏｎ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　ｔｅａｃｈｉｎｇ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｐａｒｔｉｉｔｏｎ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ；ｉｃｒｏｂｉｍｏｌｏｇｙ　ｔｅａｃｈｉｎｇ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ；ｂｉｏｓａｆｅｔｙ　－２７６－