请问细胞活性的生理生化指标有哪些?
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发布时间：2022-04-23 04:36
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时间：2023-09-10 00:07
细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆（集落）形成法、3H放射性同位素掺入法、MTT法等。其中MTT法以其快速简便，不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但MTT法形成的Formazan为水不溶性的，需要加有机溶剂溶解，由于在去上清操作时会有可能带走小部分的Formazan，故有时重复性略差。为了解决这个问题，研究人员又开发了很多种水溶性的四氮唑盐类：如XTT、CCK-8（WST-8）等。
现就这三种四氮唑盐类方法作一个简单介绍：
1.MTT法
MTT：化学名： 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲 （Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲 ，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
缺点：由于MTT经还原所产生的甲 产物不溶于水，需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲 的有机溶剂对实验者也有损害。
2.XTT法
XTT：化学名：2,3- bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]
-2H-tetrazolium hydroxide，作为线粒体脱氢酶的作用底物，被活细胞还原成水溶性的橙*甲 产物。当XTT与电子偶合剂（例如PMS）联合应用时，其所产生的水溶性的甲 产物的吸光度与活细胞的数量成正比。
优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT。
缺点：XTT水溶液不稳定，需要低温保存或现配现用。
3.CCK-8法或称WST-8法
CCK-8试剂中含有WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的*甲 产物（Formazan）。生成的甲 物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT；5、对细胞毒性小；6、为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。
缺点:1、与MTT相比，CCK-8和XTT的价格比较贵。2、CCK-8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。
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时间：2023-09-10 00:07
白细胞、红细胞体积、红细胞平均血红蛋白浓度、平均血红蛋白量、红细胞体积分布宽度指标
总胆固醇和血糖两项指标甘油三酯（TG）及极低密度脂蛋白（VLDL-C）含量等
其余见参考资料文章
参考资料：http://www.isload.com.cn/store/sqmdsbeokmsi2/1.pdf/downlaod
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时间：2023-09-10 00:08
G1780的组分
1ⅹ3 ml 裂解液，10X
1ⅹ65 ml 终止液
1ⅹ10 μl LDH 正对照
5ⅹ1.5 ml 底物混合物
1ⅹ65 ml 检测缓冲液
描述：CytoTox 96® 非放射性细胞毒性分析试剂盒以比色方法替代放射性细胞毒性分析。CytoTox 96® 分析试剂盒定量地测量乳酸脱氢酶（LDH）在细胞裂解后的释放量，释放方式与[51Cr]在放射性分析中的释放方式极为相似。乳酸脱氢酶是一种极为稳定的细胞质酶。释放出的乳酸脱氢酶存在于培养物上清中,可用酶联检测法30分钟测量。这种酶联分析导致四唑盐（INT）转化成红色甲臢化合物。颜色形成的量与裂解细胞的数目成正比。应用一个96-孔平板读数计收集可见光波长的吸收值数据。这个分析可用于测量在细胞介导的细胞毒性分析中细胞膜的完整性，这种情况下目标细胞被效应细胞裂解; 也可测量被细胞、病毒、蛋白质、化学物质等作用的目标细胞的裂解。应用四唑盐结合硫锌酰胺脱氢酶或其它电子受体确定LDH的方法已有好几年（1）。根据这一技术所进行的不同的测量天然细胞毒性的实验已有报导，并且表明这个技术与应用[51Cr]释放分析的方法所做的平行实验的结果完全相同（在实验误差之内）（2，3）。
特点
● 非放射性：不需要处理放射性废弃物或[51Cr]。
● 快速：实验前不需标记目标细胞。
● 易于使用：用标准96孔板读数计收集吸收值（可见光波长）数据。
● 多功能：可进行多种应用, 包括测量：1）细胞介导的细胞毒性；2）化学物质介导的细胞毒性；和3）总细胞数。
● 灵敏：可揭示早期、低水平的细胞膜损坏，这些损害经常不能被其它方法检测到。
应用
● 细胞毒性
● 化学灵敏性
● 总细胞数确定
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时间：2023-09-10 00:08
到医院他们就告诉你了.根据你要查的内容不同指标也不同
热心网友
时间：2023-09-10 00:09
G1780的组分
1ⅹ3 ml 裂解液，10X
1ⅹ65 ml 终止液
1ⅹ10 μl LDH 正对照
5ⅹ1.5 ml 底物混合物
1ⅹ65 ml 检测缓冲液
描述：CytoTox 96® 非放射性细胞毒性分析试剂盒以比色方法替代放射性细胞毒性分析。CytoTox 96® 分析试剂盒定量地测量乳酸脱氢酶（LDH）在细胞裂解后的释放量，释放方式与[51Cr]在放射性分析中的释放方式极为相似。乳酸脱氢酶是一种极为稳定的细胞质酶。释放出的乳酸脱氢酶存在于培养物上清中,可用酶联检测法30分钟测量。这种酶联分析导致四唑盐（INT）转化成红色甲臢化合物。颜色形成的量与裂解细胞的数目成正比。应用一个96-孔平板读数计收集可见光波长的吸收值数据。这个分析可用于测量在细胞介导的细胞毒性分析中细胞膜的完整性，这种情况下目标细胞被效应细胞裂解; 也可测量被细胞、病毒、蛋白质、化学物质等作用的目标细胞的裂解。应用四唑盐结合硫锌酰胺脱氢酶或其它电子受体确定LDH的方法已有好几年（1）。根据这一技术所进行的不同的测量天然细胞毒性的实验已有报导，并且表明这个技术与应用[51Cr]释放分析的方法所做的平行实验的结果完全相同（在实验误差之内）（2，3）。
特点
● 非放射性：不需要处理放射性废弃物或[51Cr]。
● 快速：实验前不需标记目标细胞。
● 易于使用：用标准96孔板读数计收集吸收值（可见光波长）数据。
● 多功能：可进行多种应用, 包括测量：1）细胞介导的细胞毒性；2）化学物质介导的细胞毒性；和3）总细胞数。
● 灵敏：可揭示早期、低水平的细胞膜损坏，这些损害经常不能被其它方法检测到。
应用
● 细胞毒性
● 化学灵敏性
● 总细胞数确定
.XTT法
XTT：化学名：2,3- bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]
-2H-tetrazolium hydroxide，作为线粒体脱氢酶的作用底物，被活细胞还原成水溶性的橙*甲 产物。当XTT与电子偶合剂（例如PMS）联合应用时，其所产生的水溶性的甲 产物的吸光度与活细胞的数量成正比。
优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT。
缺点：XTT水溶液不稳定，需要低温保存或现配现用。
3.CCK-8法或称WST-8法
CCK-8试剂中含有WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的*甲 产物（Formazan）。生成的甲 物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT；5、对细胞毒性小；6、为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。
缺点:1、与MTT相比，CCK-8和XTT的价格比较贵。2、CCK-8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。
热心网友
时间：2023-09-10 00:10
你搞分子生物学的？在哪个洞混呢
