细胞接毒后怎么收获病毒？不知道怎么操作，哪位能指导一下，谢谢！
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发布时间：2022-04-24 04:47
共3个回答
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时间：2023-10-29 12:01
由于你没有提到纯化，而且纯化解释起来非常复杂，所以就简单点解释了。
收获病毒要看有没有CPE，CPE是细胞裂解。
有些病毒为了自身复制要裂解细胞，这种病毒的收获可以通过离心获得，去除细胞以及部分细胞碎片后可以得到粗制的病毒。
有些病毒不裂解细胞。假如病毒在细胞内，可以通过超声破碎或者反复冻融的方法获得。
反复冻融的次数因细胞和病毒种类而异，一般冻融两次到三次。直接将病毒复制后的细胞以及培养基一起放入-20°C冷冻后再取出在37°C中融化，融化的时候要注意躲摇晃，通过尚未融化的小冰晶破碎细胞膜并将病毒释放出来。
假如病毒直接释放到培养基上清中，同样离心取出细胞后获得粗制病毒。
粗略讲起来是这样，不过因为不知道你到底要收获什么种类的病毒所以没法给出具体回答。至少要知道是昆虫细胞，还是哺乳动物细胞，有无CPE追问是哺乳细胞，病毒应该在细胞浆内装配等，反复冻融释放的话，溶解时多摇晃一般摇晃到什么程度可以再次冻起来吗？室温融化和37度融化差别大吗?
追答溶解时多摇晃是这样的：在第一次融化时尤其重要，此时细胞因为冻融脱离了培养表面，但是没有破碎。摇晃是为了使细胞破碎。没经验的时候间隔5分钟多一点摇晃一次，溶解到溶液接近室温没有任何冰晶为止可以再次进行冷冻。室温融化不如37°，这个我没法解释为什么，只能说不管到哪个实验室好像都是这么做的。
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时间：2023-10-29 12:01
病毒接种后，一般能看到cpe，如果能看到细胞病变严重，细胞大部分脱落，可直接收集上清，低速离心除去细胞碎片之后直接冻-80冰箱。如果对滴度要求很高，可以把细胞刮下来，连同上清到-80反复冻融几次，然后离心收获上清，再保！
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时间：2023-10-29 12:01
由于你没有提到纯化，而且纯化解释起来非常复杂，所以就简单点解释了。
收获病毒要看有没有CPE，CPE是细胞裂解。
有些病毒为了自身复制要裂解细胞，这种病毒的收获可以通过离心获得，去除细胞以及部分细胞碎片后可以得到粗制的病毒。
有些病毒不裂解细胞。假如病毒在细胞内，可以通过超声破碎或者反复冻融的方法获得。
反复冻融的次数因细胞和病毒种类而异，一般冻融两次到三次。直接将病毒复制后的细胞以及培养基一起放入-20°C冷冻后再取出在37°C中融化，融化的时候要注意躲摇晃，通过尚未融化的小冰晶破碎细胞膜并将病毒释放出来。
假如病毒直接释放到培养基上清中，同样离心取出细胞后获得粗制病毒。
粗略讲起来是这样，不过因为不知道你到底要收获什么种类的病毒所以没法给出具体回答。至少要知道是昆虫细胞，还是哺乳动物细胞，有无CPE追问是哺乳细胞，病毒应该在细胞浆内装配等，反复冻融释放的话，溶解时多摇晃一般摇晃到什么程度可以再次冻起来吗？室温融化和37度融化差别大吗?
追答溶解时多摇晃是这样的：在第一次融化时尤其重要，此时细胞因为冻融脱离了培养表面，但是没有破碎。摇晃是为了使细胞破碎。没经验的时候间隔5分钟多一点摇晃一次，溶解到溶液接近室温没有任何冰晶为止可以再次进行冷冻。室温融化不如37°，这个我没法解释为什么，只能说不管到哪个实验室好像都是这么做的。
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时间：2023-10-29 12:02
一般加P1病毒后6-7天收P2，加P2 后3-4天收P3，具体看细胞状态，500g，离心5min，收集上清就是病毒液。病毒长期存放在-80，短期可放在4度，避光保存，反复冻融会影响病毒活性。追问我的病毒是在细胞浆里的，不在细胞外的上清里，那要怎么能获得病毒吗？为什么避光保存？
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时间：2023-10-29 12:01
病毒接种后，一般能看到cpe，如果能看到细胞病变严重，细胞大部分脱落，可直接收集上清，低速离心除去细胞碎片之后直接冻-80冰箱。如果对滴度要求很高，可以把细胞刮下来，连同上清到-80反复冻融几次，然后离心收获上清，再保！
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时间：2023-10-29 12:02
一般加P1病毒后6-7天收P2，加P2 后3-4天收P3，具体看细胞状态，500g，离心5min，收集上清就是病毒液。病毒长期存放在-80，短期可放在4度，避光保存，反复冻融会影响病毒活性。追问我的病毒是在细胞浆里的，不在细胞外的上清里，那要怎么能获得病毒吗？为什么避光保存？
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时间：2023-10-29 12:01
由于你没有提到纯化，而且纯化解释起来非常复杂，所以就简单点解释了。
收获病毒要看有没有CPE，CPE是细胞裂解。
有些病毒为了自身复制要裂解细胞，这种病毒的收获可以通过离心获得，去除细胞以及部分细胞碎片后可以得到粗制的病毒。
有些病毒不裂解细胞。假如病毒在细胞内，可以通过超声破碎或者反复冻融的方法获得。
反复冻融的次数因细胞和病毒种类而异，一般冻融两次到三次。直接将病毒复制后的细胞以及培养基一起放入-20°C冷冻后再取出在37°C中融化，融化的时候要注意躲摇晃，通过尚未融化的小冰晶破碎细胞膜并将病毒释放出来。
假如病毒直接释放到培养基上清中，同样离心取出细胞后获得粗制病毒。
粗略讲起来是这样，不过因为不知道你到底要收获什么种类的病毒所以没法给出具体回答。至少要知道是昆虫细胞，还是哺乳动物细胞，有无CPE追问是哺乳细胞，病毒应该在细胞浆内装配等，反复冻融释放的话，溶解时多摇晃一般摇晃到什么程度可以再次冻起来吗？室温融化和37度融化差别大吗?
追答溶解时多摇晃是这样的：在第一次融化时尤其重要，此时细胞因为冻融脱离了培养表面，但是没有破碎。摇晃是为了使细胞破碎。没经验的时候间隔5分钟多一点摇晃一次，溶解到溶液接近室温没有任何冰晶为止可以再次进行冷冻。室温融化不如37°，这个我没法解释为什么，只能说不管到哪个实验室好像都是这么做的。
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时间：2023-10-29 12:01
病毒接种后，一般能看到cpe，如果能看到细胞病变严重，细胞大部分脱落，可直接收集上清，低速离心除去细胞碎片之后直接冻-80冰箱。如果对滴度要求很高，可以把细胞刮下来，连同上清到-80反复冻融几次，然后离心收获上清，再保！
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时间：2023-10-29 12:02
一般加P1病毒后6-7天收P2，加P2 后3-4天收P3，具体看细胞状态，500g，离心5min，收集上清就是病毒液。病毒长期存放在-80，短期可放在4度，避光保存，反复冻融会影响病毒活性。追问我的病毒是在细胞浆里的，不在细胞外的上清里，那要怎么能获得病毒吗？为什么避光保存？
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时间：2023-10-29 12:01
由于你没有提到纯化，而且纯化解释起来非常复杂，所以就简单点解释了。
收获病毒要看有没有CPE，CPE是细胞裂解。
有些病毒为了自身复制要裂解细胞，这种病毒的收获可以通过离心获得，去除细胞以及部分细胞碎片后可以得到粗制的病毒。
有些病毒不裂解细胞。假如病毒在细胞内，可以通过超声破碎或者反复冻融的方法获得。
反复冻融的次数因细胞和病毒种类而异，一般冻融两次到三次。直接将病毒复制后的细胞以及培养基一起放入-20°C冷冻后再取出在37°C中融化，融化的时候要注意躲摇晃，通过尚未融化的小冰晶破碎细胞膜并将病毒释放出来。
假如病毒直接释放到培养基上清中，同样离心取出细胞后获得粗制病毒。
粗略讲起来是这样，不过因为不知道你到底要收获什么种类的病毒所以没法给出具体回答。至少要知道是昆虫细胞，还是哺乳动物细胞，有无CPE追问是哺乳细胞，病毒应该在细胞浆内装配等，反复冻融释放的话，溶解时多摇晃一般摇晃到什么程度可以再次冻起来吗？室温融化和37度融化差别大吗?
追答溶解时多摇晃是这样的：在第一次融化时尤其重要，此时细胞因为冻融脱离了培养表面，但是没有破碎。摇晃是为了使细胞破碎。没经验的时候间隔5分钟多一点摇晃一次，溶解到溶液接近室温没有任何冰晶为止可以再次进行冷冻。室温融化不如37°，这个我没法解释为什么，只能说不管到哪个实验室好像都是这么做的。
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时间：2023-10-29 12:01
病毒接种后，一般能看到cpe，如果能看到细胞病变严重，细胞大部分脱落，可直接收集上清，低速离心除去细胞碎片之后直接冻-80冰箱。如果对滴度要求很高，可以把细胞刮下来，连同上清到-80反复冻融几次，然后离心收获上清，再保！
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时间：2023-10-29 12:02
一般加P1病毒后6-7天收P2，加P2 后3-4天收P3，具体看细胞状态，500g，离心5min，收集上清就是病毒液。病毒长期存放在-80，短期可放在4度，避光保存，反复冻融会影响病毒活性。追问我的病毒是在细胞浆里的，不在细胞外的上清里，那要怎么能获得病毒吗？为什么避光保存？
