...用缓冲液提取蛋白质,用什么方法能得到蛋白质溶液而不含那些沉淀物...
发布网友
共4个回答
热心网友
不知道你指的是动物细胞还是植物细胞，进行植物蛋白提取时，通常用的方法是TCA/丙酮法，即液氮破碎细胞---将粉末溶于TCA\丙酮缓冲液---然后加入蛋白酶抑制剂---离心后，得到的沉淀中包含蛋白还有细胞壁碎片等杂质，----然后加入丙酮溶液反复洗涤-----再加入蛋白裂解液（成分是尿素，硫脲，还要蛋白酶抑制剂等），该裂解液作用是将蛋白溶解----再次离心---此时沉淀中含有的蛋白已经很少，而上清中含有的多是蛋白，核酸及多糖---再加入适当体积的核酸酶除去核酸--最后上清中得到的多是蛋白。
至于楼主说的离心后沉淀不稳，是不是因为离心g和时间还不够,可以尝试一下改变条件，我们用的是20000g以上离心半小时。
热心网友
可以用离心分离法
阿法拉伐一次性连续流碟片离心机CultureOne™系列，可以帮助在分离过程中连续排出高浓度的细胞，提高离心液回收率和离心液透明度。
● CultureOne™系列适用于50L---2000L处理规模的一次性连续流离心机
● 即插即用的移动模块设计，无需工程配套，可在不同产线间灵活切换
● 全密闭下进料设计与固相连续带压排放，非常适合高固含量物料，保护细胞完整，得率高
● 无需进行CIP和SIP，缩短批次间切换时间，无蒸汽、水等工程配套，仅220V电源，无菌快速对接，占地面积仅1平米多，在不同生产线间灵活切换转移。
热心网友
你后面要做什么实验？
热心网友
超声破碎~
